在水产动物疾病的防控中，由于抗生素等药物的大量使用，导致了细菌多重抗药性、药物残留和危害环境等问题的出现，使得人类致力寻求对自身和环境无毒、无害的药物和产品，以期能够部分或全部替代抗生素的使用。而益生菌的出现和使用，则相应的缓解了以上问题。本研究就是基于以上理念，在国内首次从鲤鱼肠黏膜分离筛选出具有抗逆性、对病原菌具有拮抗性、相对安全的益生乳酸菌。为其在水产养殖业的应用打下了良好的基础。本研究主要分以下两部分试验进行：试验一主要做的是益生乳酸菌株的筛选。首先通过酸化胆盐培养基，从鲤鱼肠黏膜固有菌群中共分离到8株乳酸菌。然后通过耐受胆盐、耐受pH值性、耐受蛋白酶和耐高温等试验，筛选出2株抗逆性较强的菌株，其中在胆盐耐受性试验中，YL-1和YL-7在胆盐浓度0.4％、培养4h时仍有30％以上的存活率；在pH值耐受性试验时，2株乳酸菌均可在酸性和碱性条件下存活；胰蛋白酶对2株菌的存活率没有影响；在70℃的高温中，2株乳酸菌均有一定的耐受性。在体外抑菌试验中，通过共培养和上清液抑菌试验的结果发现：YL-1对嗜水气单胞菌的抑菌效果优于YL-7，因此选用YL-1做为益生菌的候选菌株。通过对YL-1上清液抑菌物质分析可以发现，其抑菌物质主要是有机酸和对胰蛋白酶敏感的一类物质。在YL-1的药物敏感性试验中发现，该菌株存在着一定的耐药性。对小白鼠和鲤鱼的接种，初步认定菌株YL-1具有安全性。最后，通过一系列的生理生化试验，初步鉴定YL-1是粪肠球菌。试验二为YL-1增菌培养基的优化。在前半部试验中，主要是通过对最佳碳源的筛选、最佳氮源的筛选、最佳无机盐离子的筛选以及最佳刺激因子的筛选等单因子试验，筛选出对YL-1生长有利的各个因子。之后在SAS软件的辅助下，通过Plackett-Burman试验设计在培养基的各个因子中筛选出对YL-1生长有利的重要因子，再进行最陡爬坡试验逼近最大响应区域，最后在Box-Behnken试验设计下确定最大响应值，并通过优化的结果验证，表明预测值和实际值有良好的拟合性，优化模型可靠。最后确定的YL-1培养的最佳培养基为：蛋白胨1.365％、牛肉膏1.25％、酵母浸粉0.625％、麦芽糖2.5％、吐温-80 0.1％、KH₂PO₄0.2％、柠檬酸三铵0.16％、MgSO₄0.25％、初始pH值6.4。