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人类白细胞抗原-B(Human leukocyte antigen-B,HLA-B)相关转录物5(HLA-B related transcripts 5,BAT5)又称为ABHD16A(Abhydrolase Domain Containing 16A),属于含有α/β-水解酶折叠结构域(ABHD)蛋白质超家族的代谢丝氨酸水解酶。其在Gene Card中的注释包括甘油衍生物水解酶活性,但其确切的功能有待进一步研究。为深入研究ABHD16A促炎症反应功能及与其它涉及免疫的分子之间可能存在的相互关系,我们制备了ABHD16A的多克隆抗体。通过比对已知的哺乳动物的ABHD16A的氨基酸序列,发现ABHD16A具有高度保守性(98.01%)。根据美国国家生物技术信息中心(National Center of Biotechnology Information,NCBI)上提交的人ABHD16A基因编码序列(Coding sequence,CDS)设计一对特异性引物,以人肝癌细胞HepG2 cDNA为模板扩增ABHD16A编码区,将其定位克隆至表达载体pET28a,并在E.coli BL21(DE3)中诱导表达。通过以切胶免疫和包涵体免疫分别制备ABHD16A的抗血清,制备的抗血清同样能够结合其它哺乳动物的ABHD16A,然后利用人肝癌细胞Hep G2中过表达的Sus Scrofa ABHD16A来最终检验抗血清的特异性。结果表明,通过直接利用人ABHD16A包涵体蛋白辅佐剂免疫Balb/c小鼠获得的血清,具有与ABHD16A结合的活性,为进一步研究ABHD16A的功能提供了实验材料,具有实际应用价值。日本流行性脑炎(Japanese Epidemic Encephalitis,JE)是由日本流行性脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)通过血脑屏障感染脑组织细胞引起的病变,是一种人畜共患的蚊媒传染病,严重危害人类健康和养殖业的发展。根据JEV E蛋白的核苷酸序列,利用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了一种灵敏的、可靠的、可视化检测JEV的方法。结果显示,该方法检测灵敏度可达到5个拷贝,与实验中的其它参照序列无交叉扩增。该方法灵敏度好,并具有经济、可靠和快速、易操作的优点,无需专门仪器,特别适合于现场检测。同时为本实验室后续开展JEV的相关研究提供了可靠的检测方法和思路。