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背景和目的：microRNA-223(miR-223)可以促进粒细胞的分化和成熟,可抑制Stathminl的表达对肝癌发生起负性调控作用,miR-223也可以通过调控抑癌基因EPB41L3的表达促进胃癌的转移和侵袭。为进一步探讨miR-223的功能,本实验室通过生物信息学预测发现许多miR-223的潜在靶基因,猜测miR-223可能通过调控这些基因的表达而影响肿瘤细胞的生长、增殖、侵袭转移等,并在前期研究中证实miR223确实下调IGF-1R的表达进而抑制细胞的增殖,但是miR-223对肿瘤细胞辐射敏感性的作用还不清楚。ATM作为DNA双链断裂后促进DNA同源重组修复的重要调控因子,在DNA损伤修复中发挥重要作用。本研究的目的是探讨miR-223对ATM的调控作用及miR-223对肿瘤细胞放射敏感性的影响,为改善肿瘤细胞的放射治疗效果提供新思路。材料和方法：PCR扩增包含miR-223结合位点的ATM3’UTR片段,将其克隆到psi-CHECK载体中,构建psi-CHECK-ATM3’UTR(?)贡粒；PCR扩增miR-223片段,将其克隆到慢病毒载体PLL3.7中,将psi-CHECK-ATM3’UTR质粒与PLL3.7-miR-223质粒共转染到293T细胞,利用双荧光素酶报告基因方法验证miR-223对ATM的调控作用；包装PLL3.7-miR-223慢病毒,感染人脑胶质瘤U87-MG细胞,建立高表达miR-223的稳定细胞株；Real-time PCR检测miR-223、 ATM的表达水平,Western Blotting检测ATM蛋白的表达,给予细胞0、1、2、4、6、8Gy X线射线照射后,克隆形成实验检测细胞的放射敏感性,LQ模型拟合细胞存活曲线。结果：双荧光素酶报告基因检测显示共转染miR-223和psi-CHECK-ATM3’-UTR后荧光活性下降明显,差别具有统计学意义(p=0.01),并且miR-223的抑制剂可以逆转荧光活性的下降,miR-223可以与ATM3’UTR结合调控ATM。RT-PCR和real-time PCR证实miR-223在U87-MG中过表达成功；Real-time PCR检测miR-223过表达后ATM mRNA表达没有明显变化,而Western Blotting结果显示ATM蛋白水平明显降低。克隆形成实验检测U87-223和U87-EV细胞的放射敏感性,经LQ模型拟合后得出U87223细胞存活曲线位于U87-EV细胞下方,SF2(U87-223)=0.483<SF2(U87-EV)=0.607, D10%(U87-223)=5.43,D10%(U87-EV)=7.46,增敏比SER10%=D10%(U87-EV)/D10%(U87-223)=7.46/5.43=1.373,过表达miR-223可以增强人脑胶质瘤U87MG细胞的放射敏感性。结论：miR-223可以在翻译水平抑制ATM的表达,过表达miR-223可以提高U87MG细胞的放射敏感性,miR-223作为基因调控因子可以为肿瘤细胞辐射增敏提供新靶点。