地衣芽孢杆菌的分离鉴定及对肉鸡的饲用效果

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本文旨在从肉鸡肠道中分离出一株芽孢菌并研究其对肉鸡的应用效果。选择一只健康的海南野生态鸡,将其回肠段黏膜匀浆后离心,取其上清液,经水浴(65℃,45min)、模拟胃液和模拟小肠液处理后,以MH平板培养法分离出多株芽孢杆菌:其中L号株的发酵液经检测具有分泌蛋白酶和淀粉酶活性,并对革兰氏阴性菌嗜水气单胞菌(ATCC 35654)、迟缓爱德华氏菌(ATCC 15947)、猪霍乱沙门氏菌(CVCC 503)和猪胸膜肺炎放线杆菌(CVCC 3589)以及革兰氏阳性菌猪链球菌(CVCC 3307)均有抑菌作用,具广谱抗菌活性。经16S r DNA序列测定分析,鉴定其为地衣芽孢杆菌,并被命名为地衣芽孢杆菌L株。随后,开展动物饲养试验。选择48 d健康状况良好的麻黄公鸡共1260只,随机分成7个组(A、B、C、D、E、F和G),每处理组4个重复,每重复45只;7组鸡分别饲喂7种试验饲粮,为期4周。7种试验饲粮即在基础饲粮基础上添加地衣芽孢杆菌L株,其添加剂量分别为0 CFU/g、10~1CFU/g、10~2CFU/g、10~3CFU/g、10~4CFU/g、10~5CFU/g和10~6CFU/g。在饲养试验结束后,从A、B、D、F和G组中每重复栏鸡随机抽取1只进行血清、小肠和盲肠采样处理,以测定其血清生理生化、小肠绒毛结构及盲肠菌群结构等指标。动物试验结果表明:(1)地衣芽孢杆菌L株在肉鸡饲粮中添加量为10~5~10~6CFU/g时可显著提高肉鸡的平均日采食量和平均日增重(P<0.05)。(2)在肉鸡饲粮中添加10~3~10~6CFU/g地衣芽孢杆菌L株可显著减弱肉鸡的免疫反应强度(P<0.05),显著提高肉鸡的抗氧化能力(P<0.05)。(3)地衣芽孢杆菌L株在肉鸡饲粮中添加(10~3~10~6CFU/g)可增加肉鸡盲肠菌群的多样性,盲肠菌群中的益生性拟杆菌(Bacteroides)、颤螺旋属(Oscillospira)、瘤胃球菌(Ruminococcus)、费氏杆菌(Faecalibacterium)、巨单胞菌(Megamonas)和乳酸杆菌(Lactobacillus)等属的相对丰度有所升高(P>0.05)。以上结果表明,地衣芽孢杆菌L株在麻黄肉鸡饲粮中添加量为10~5CFU/g为宜。其添加量为10~5CFU/g时可提高肉鸡的日均耗料量和日均增重,减弱肉鸡的免疫反疫强度,提高肉鸡的抗氧化能力,增加肉鸡盲肠菌群的多样性,在一定程度上可提高菌群中益生性菌属的相对丰度,降低菌群中有害菌菌属的相对丰度。
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