【摘 要】
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目的:黑色素瘤是致命性的皮肤恶性肿瘤,其发病率在世界范围内持续上升。手术、放疗和化疗等治疗恶性黑色素瘤的传统方法,具有创伤大、不良反应明显等问题,且未能显著改善晚期恶性黑色素瘤患者的生存率。近年来,生物免疫治疗在恶性黑色素瘤治疗中取得了突破性的进展。其中肿瘤细胞疫苗作为一种新兴的肿瘤治疗方式备受关注。但单独的肿瘤细胞疫苗免疫原性较差,故使用海带多糖硫酸酯与紫外灭活的肿瘤细胞疫苗联合治疗小鼠黑色素瘤
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目的:黑色素瘤是致命性的皮肤恶性肿瘤,其发病率在世界范围内持续上升。手术、放疗和化疗等治疗恶性黑色素瘤的传统方法,具有创伤大、不良反应明显等问题,且未能显著改善晚期恶性黑色素瘤患者的生存率。近年来,生物免疫治疗在恶性黑色素瘤治疗中取得了突破性的进展。其中肿瘤细胞疫苗作为一种新兴的肿瘤治疗方式备受关注。但单独的肿瘤细胞疫苗免疫原性较差,故使用海带多糖硫酸酯与紫外灭活的肿瘤细胞疫苗联合治疗小鼠黑色素瘤,并通过体内及体外实验评价其治疗效果,从基础实验的角度为临床上肿瘤的免疫治疗提供一个可能的选择和思路。方法:通过紫外辐照灭活小鼠黑色素瘤细胞制备细胞疫苗,通过台盼蓝染色检测黑色素瘤细胞是否死亡,通过CCK8法检测黑色素瘤细胞的增殖能力。为了验证细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯黑色素瘤的治疗作用,把42只C57BL/6小鼠随机分成7组,均背部皮下注射1*10~5个黑色素瘤细胞。分别于第3天和第10天将PBS、全细胞疫苗、铝佐剂、海带多糖硫酸酯、全细胞疫苗联合铝佐剂、全细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯注射到荷瘤小鼠大腿肌肉中,另有一组小鼠分别于-7天和第10天将全细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯注射到荷瘤小鼠大腿肌肉中。从荷瘤第9天开始,隔天测量并记录小鼠的肿瘤长径及宽径,观察各组小鼠的生存状态,并通过流式细胞术检测小鼠T细胞及细胞因子。结果:1.台盼蓝染色与CCK8结果显示紫外辐照10 min使黑色素瘤细胞死亡且保持完整形态;2.全细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯组(预防+治疗)显著延缓了黑色素瘤的生长速度,且该组肿瘤体积较对照组明显减小,差异有统计学意义(P<0.05);3.全细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯组(预防+治疗)与对照组相比,显著提高了小鼠脾脏CD4+T及CD8+T细胞分泌的TNF-α和IFN-γ含量,差异有统计学意义(P<0.05);4.全细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯组(预防+治疗)与对照组相比,显著提高了小鼠肿瘤组织和外周血CD8+T细胞的比例,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.紫外灭活的黑色素瘤细胞疫苗具有良好的安全性和免疫原性;2.紫外灭活的黑色素瘤细胞疫苗与海带多糖硫酸酯联用可以抑制黑色素瘤的生长速度;3.紫外灭活的黑色素瘤细胞疫苗联合海带多糖硫酸酯可以激活小鼠脾脏T细胞的活化和细胞因子的分泌,上调其抗肿瘤免疫功能。
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