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目的：类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以滑膜组织慢性炎症病变为显著特征的自身免疫性疾病，发病率及致残率高，严重危害人类健康。尽管当前X射线、类风湿因子及抗环瓜氨酸肽抗体等血清学标志物的检测在RA的临床诊断中有着广泛的应用，但多数患者确诊时全身多个关节已经出现进行性破坏，因而错失了最佳治疗时机，所以人们仍在期待新一代RA诊断指标的出现。微小RNAs（microRNAs,miRNAs）是一类非编码小分子RNA，长度仅为21-25nt，广泛存在于真核生物体内，与靶基因mRNA的3′端非编码区结合后可介导mRNA降解或者抑制其翻译，主要在转录后水平发挥强大的基因调控功能。现已有大量研究发现关节滑膜组织以及滑液成纤维细胞中miR-155,miR-146a,miR-203的表达失调在RA的发病过程中扮演着十分重要的角色，而外周血单个核细胞中miR-16,miR-146a,miR-132,miR-155的过度表达则对RA的早期诊断具有更高的特异性和敏感性，此外miR-16的异常表达还与疾病活动度呈显著相关，以上证据均提示miR-16有望成为RA早期诊断的新一代分子标志物，并且也可作为监测病情发展的有效指标。目前关于miRNA与RA的研究大多使用滑膜组织及细胞作为研究对象，而国内尚未见有关RA患者血浆和关节滑液miRNA表达水平的报道，与组织/细胞miRNA相比，血清或血浆等体液miRNA易于方便取材，并可随时进行检测，具有更好的临床应用前景。本实验则首次通过检测miR-16在RA患者血浆和关节滑液中的表达，进而探讨其在RA早期筛选、鉴别诊断以及病情评估中的应用价值。方法：血浆以及外周血单个核细胞分别来源于30例RA患者和20例正常健康人，关节滑液则来源于16例上述RA患者及10例骨关节患者（osteoarthritis，OA）。应用茎环逆转录引物实时荧光定量PCR(Stem-loopRT-qPCR),SYBR Green I染料法分别检测miR-16在血浆、关节滑液以及外周血单个核细胞中的表达水平，以U6snRNA作为内参。实验数据输入spss18.0软件包中进行统计学分析, Mann-Whitney U检验用于分析并比较miR-16各组间的表达水平，以P<0.05为差异具有统计学意义；miR-16的表达水平与临床各指标的相关性采用Spearman等级相关分析，以P<0.05为差异具有统计学意义。结果：1目的基因miR-16和内参U6snRNA的扩增曲线及熔解曲线均良好，未出现非特异性产物及引物二聚体现象。2miR-16在RA患者血浆、关节滑液以及外周血单个核细胞中的表达miR-16在血浆中的表达水平显著高于关节滑液以及外周血单个核细胞（P<0.01），上调变化倍数分别为8.7倍和9.6倍；miR-16在关节滑液中的表达水平高于外周血单个核细胞，上调变化倍数为1.5倍，但无统计学意义（P>0.05）。3miR-16在RA患者及正常健康人血浆、外周血单个核细胞中的表达miR-16在RA患者血浆中的表达水平低于正常健康人，下调变化倍数为0.65倍，但无统计学意义（P>0.05）；miR-16在RA患者外周血单个核细胞中的表达水平显著高于正常健康人（P<0.01），上调变化倍数为1.9倍。4miR-16在RA及OA患者关节滑液中的表达与OA患者相比，miR-16在RA患者关节滑液中的表达水平显著升高（P<0.01），上调变化倍数为6.25倍。5miR-16的表达与RA临床相关指标的关系血浆miR-16的表达与DAS28评分(28-joint DiseaseActivity Score)呈负相关（P<0.05），与年龄、性别、病程、红细胞沉降率（erythrocytesedimentation tate，ESR）及C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）均无关（P>0.05）；外周血单个核细胞miR-16的表达与DAS28评分、ESR及CRP呈正相关（P<0.05），与年龄、性别及病程无关（P>0.05）。关节滑液miR-16的表达与年龄、性别、病程、DAS28评分、ESR及CRP均无关（P>0.05）；结论：1RA患者血浆和关节滑液miR-16的来源不相同，彼此之间没有相关性，在血浆和关节滑液中有可能存在不同的miRNA表达谱。2RA患者关节滑液miR-16的过度表达可能与局部炎症刺激有很大关系。检测miR-16在关节滑液中的表达可为临床对RA与OA进行鉴别诊断以及深入探索RA的发病机制提供了新的思路。3血浆miR-16的表达水平有望成为评价RA病情活动度的有效指标。