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新疆紫草(Arnebia euchroma)以根入药，具有抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。随着紫草资源不断减少，市场上逐渐出现以假乱真、以次充好等情况。因此，本实验以新疆道地药材新疆紫草为实验材料，首先进行紫草叶中总黄酮提取工艺优化及活性成分测定，继而开展质量研究，并筛选适用于紫草药材鉴定的DNA条形码，为进一步控制新疆紫草药材质量和规范化生产提供依据，同时对保证临床用药安全性和有效性具有重要意义。主要研究内容及结果如下：
(1)筛选新疆紫草浸种的最佳外源激素；使用超声提取工艺，优选新疆紫草叶中总黄酮的最佳提取工艺。表明浸种的最佳外源激素为150mg/L矮壮素。最优工艺条件为：超声浸提次数4次、超声提取温度45℃、乙醇浓度70%、料液比1:30。
(2)采用紫外分光光度法(UV)测定不同产地、生长年限野生新疆紫草中总黄酮、多糖及羟基萘醌总色素的含量；采集14批不同生长期人工栽培新疆紫草药材，采用高效液相色谱法(HPLC)和UV法测定其有效成分的含量。表明不同产地、生长年限新疆紫草中有效成分含量差异较大。5月份采收2年生新疆紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、羟基萘醌总色素含量均最高，分别为0.109%、1.388%、1.906%，4月份采收2年生药材中β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁最高，为0.535%。
(3)通过薄层色谱法(TLC)和HPLC法对34批新疆紫草药材进行定性鉴别及定量分析，建立HPLC指纹图谱，结合化学计量学研究其化学组分特征和分类，同时测定萘醌类成分的含量，并进行差异标志物的筛选。结果获得的新疆紫草TLC鉴别方法专属性强且斑点清晰。建立的新疆紫草HPLC指纹图谱特征性强、稳定性高，34批样品共获得12个共有峰，除市售品中的3批药材相似度低于0.72外，其余药材的相似度均高于0.86。聚类分析(HCA)将34批新疆紫草药材分为2类，与主成分分析(PCA)结果类似，正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)能将不同来源样品进行区分，共识别出6个质量差异性标记物，指认左旋紫草素、乙酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁3种成分。34批新疆紫草样品中有效成分的含量存在显著性差异。
(4)采用ITS、ITS2、psbA-trnH三种条形码序列对紫草及其混伪品进行鉴定分析，并考察比较其对于紫草药材鉴别的稳定性和准确性。结果显示，各序列的鉴定成功率依次为ITS2、ITS、psbA-trnH。种间最小变异大于种内最大变异的序列为ITS2，且平均种内变异最小。在barcodinggap检验时，ITS2序列种内和种间无重叠区，其次为ITS序列重叠区域较小。NJ树结果表明ITS、ITS2序列对样品具有较好的分离效果，均将软紫草属与其他属分开，psbA-trnH序列未将紫草药材及其混伪品分开。综合结果表明，ITS2序列为鉴别紫草药材及其混伪品的较理想条形码。
(1)筛选新疆紫草浸种的最佳外源激素；使用超声提取工艺，优选新疆紫草叶中总黄酮的最佳提取工艺。表明浸种的最佳外源激素为150mg/L矮壮素。最优工艺条件为：超声浸提次数4次、超声提取温度45℃、乙醇浓度70%、料液比1:30。
(2)采用紫外分光光度法(UV)测定不同产地、生长年限野生新疆紫草中总黄酮、多糖及羟基萘醌总色素的含量；采集14批不同生长期人工栽培新疆紫草药材，采用高效液相色谱法(HPLC)和UV法测定其有效成分的含量。表明不同产地、生长年限新疆紫草中有效成分含量差异较大。5月份采收2年生新疆紫草中左旋紫草素、乙酰紫草素、羟基萘醌总色素含量均最高，分别为0.109%、1.388%、1.906%，4月份采收2年生药材中β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁最高，为0.535%。
(3)通过薄层色谱法(TLC)和HPLC法对34批新疆紫草药材进行定性鉴别及定量分析，建立HPLC指纹图谱，结合化学计量学研究其化学组分特征和分类，同时测定萘醌类成分的含量，并进行差异标志物的筛选。结果获得的新疆紫草TLC鉴别方法专属性强且斑点清晰。建立的新疆紫草HPLC指纹图谱特征性强、稳定性高，34批样品共获得12个共有峰，除市售品中的3批药材相似度低于0.72外，其余药材的相似度均高于0.86。聚类分析(HCA)将34批新疆紫草药材分为2类，与主成分分析(PCA)结果类似，正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)能将不同来源样品进行区分，共识别出6个质量差异性标记物，指认左旋紫草素、乙酰紫草素和β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁3种成分。34批新疆紫草样品中有效成分的含量存在显著性差异。
(4)采用ITS、ITS2、psbA-trnH三种条形码序列对紫草及其混伪品进行鉴定分析，并考察比较其对于紫草药材鉴别的稳定性和准确性。结果显示，各序列的鉴定成功率依次为ITS2、ITS、psbA-trnH。种间最小变异大于种内最大变异的序列为ITS2，且平均种内变异最小。在barcodinggap检验时，ITS2序列种内和种间无重叠区，其次为ITS序列重叠区域较小。NJ树结果表明ITS、ITS2序列对样品具有较好的分离效果，均将软紫草属与其他属分开，psbA-trnH序列未将紫草药材及其混伪品分开。综合结果表明，ITS2序列为鉴别紫草药材及其混伪品的较理想条形码。