【摘 要】
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小分子物质对生物体内的细胞稳态、信号传导、免疫与代谢及生活环境具有重大影响。肼是一种易溶于水的挥发性有毒物质,具有神经毒性作用,通过皮肤接触或口服食入,对人体器官
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小分子物质对生物体内的细胞稳态、信号传导、免疫与代谢及生活环境具有重大影响。肼是一种易溶于水的挥发性有毒物质,具有神经毒性作用,通过皮肤接触或口服食入,对人体器官造成严重损害。次氯酸是一种重要的活性氧来源物质,在生物系统中的病理生理过程起着重要作用,人体内次氯酸水平过多或过少都会导致疾病的产生。然而,传统检测方法对于这两种小分子物质的检测存在仪器昂贵、耗时长、样品处理复杂、灵敏度较低、生物相容性差,不能对组织和细胞中的小分子物质实现动态、可视化检测等问题。相比于传统的检测分析技术,荧光探针具有体积小,操作简单,非侵入性,专一性和灵敏性等优点,能够实现对活细胞和组织中小分子的实时、动态、可视化监测。因此,简单快捷的荧光探针技术受到广泛关注。四氢萘酮作为一种重要的化工原料,是许多天然产物和医药中间体的基本结构单元,在医药、化学工业和农业等领域起着重要的作用。本文基于萘酮骨架设计合成了两种小分子荧光探针,用于检测小分子肼及次氯酸,并对其光谱性质和生物应用做了研究。基于萘酮骨架,以巴比妥酸为识别基团,合成了用于检测肼的小分子荧光探针DPT。探针DPT本身有较弱的荧光,在加入N2H4·H2O后,与巴比妥酸发生加成环化-还原醛醇的反应使巴比妥酸离去,得到的DPT-N2H4发出强烈的黄色荧光。研究表明,探针DPT用于检测肼,具有Stokes位移大(>140 nm),荧光量子产率高,线性关系良好,灵敏度高,选择性好,抗干扰能力强,检出限低(50 n M)等优点。此外,探针DPT的细胞毒性低,生物相容性好,并成功用于活细胞中N2H4·H2O的荧光成像。在萘酮骨架的基础上,合成了用于检测Cl O-的“关-开”型小分子荧光探针DEI。探针DEI几乎没有荧光,在与Cl O-反应后,分子内的C=C键被切断,得到具有强烈荧光的醛基化合物。探针DEI具有环境敏感性、荧光量子产率高、线性关系良好、抗干扰能力强、灵敏度和选择性高等优点,其检出限为0.65 n M。荧光探针技术与共聚焦显微技术的联用,将检测提高至细胞和亚细胞水平,有效实现对生物体内小分子物质的动态监测,为疾病的诊断、治疗及环境监测提供了技术手段。
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