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1背景和目的胸腺瘤在人体肿瘤中是比较少见的一类肿瘤,它来自胸腺组织,多位于前上纵隔,多见于成人,儿童发病较罕见,男女发病率基本无差异。根据镜下所见可将胸腺瘤分为三类：(1),上皮细胞性胸腺瘤；(2),淋巴细胞性胸腺瘤；(3),淋巴上皮细胞性或混合性胸腺瘤。多数为良性病变,但少数病例在临床上仍表现除恶性行为,如在胸膜、心包种植,纵隔淋巴结及肺转移等周围组织器官。目前,胸腺瘤的诊断并不困难,根据患者的临床症状和体征并结合影像学检查进行综合分析,基本可以作出诊断。在胸腺瘤的治疗上主要以手术完整切除为主的综合治疗,除临床证实肿瘤无法切除或胸外转移者均应及时手术治疗。现普遍认为胸腺瘤的预后与胸腺瘤组织是否具有侵犯性和是否合并与胸腺瘤有关的其他疾病而与病理分型无关。Kondo等研究报道,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者的5年生存率分别为100%、98%、89%、71%。近年来研究表明,PTEN、Galectin-3及Ki-67在各种肿瘤的发生、发展、转移及预后中可能起着重要作用。有研究显示,在胸腺瘤组织中存在PTEN失表达及Ki-67过表达,PTEN与Ki-67的表达呈负相关,这提示PTEN与Ki-67在胸腺瘤细胞恶变过程中起着重要作用,可能共同影响着胸腺瘤的发生、发展过程。Galectin-3则可通过调节细胞生长、抑制细胞凋亡及介导细胞黏附等途径在肿瘤的发生、发展过程中也起着重要作用。以往研究表明,Galectin-3的表达水平及其在细胞内的分布与甲状腺癌、结肠癌、胃癌、肺癌、肝癌等癌症均存在相关性。但是尚未有从蛋白水平对Galectin-3的异常表达与胸腺瘤的关系进行研究。本实验通过组织病理学及免疫组化等方法检测PTEN、Galectin-3及Ki-67在胸腺瘤组织中的表达变化情况,探讨它们在胸腺瘤发生、发展过程中的作用和意义,为胸腺瘤的早期诊断、及时治疗、预防复发及判断预后提供依据。2材料和方法2.1实验材料40例胸腺瘤标本为郑州大学第一附属医院2007年7月-2009年6月经病理证实的手术切除标本。其中男22例,女18例；年龄2岁-73岁,平均年龄38岁。所有标本经组织病理学检查证实为胸腺瘤组织,并进行福尔马林固定、石蜡包埋、连续切片备用。2.2实验方法采用免疫组织化学SP法,鼠抗人PTEN单克隆抗体,兔抗人Galectin-3多克隆抗体,鼠抗人Ki-67单克隆抗体,SP免疫组织化学试剂盒及二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均购北京中杉金桥生物技术有限公司。操作步骤严格按SP免疫组织化学试剂盒说明进行。以磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作阴性对照。2.3结果判断显微镜下观察细胞内具有清晰可见的和定位准确的黄色、棕黄色或棕褐色颗粒为阳性染色。PTEN蛋白和Galectin-3均定位于细胞浆,Ki-67蛋白定位于细胞核。由2位以上病理医生对免疫组织化学染色进行评价,在400倍视野下任意选择5个视野,每个视野计数200个细胞,细胞无阳性反应或阳性细胞数<10%为阴性,阳性细胞数>10%为阳性。用PBS代替一抗作阴性对照。2.4统计方法应用SPSS15.0 for Windows统计软件进行统计处理,用x2检验及Fisher s精确概率法进行显著性检验,用Spearman等级相关进行相关性分析。以α=0.05为检验水准。3结果PTEN在5例正常胸腺组织中全部阳性表达,在16例A+AB型胸腺瘤患者中有12例(75.0%)阳性表达。在17例B1+B2型胸腺瘤患者中仅有5例(29.4%)阳性表达。在7例B3型胸腺瘤患者中有1例(14.3%)阳性表达。PTEN在Masaoka分期Ⅰ+Ⅱ期患者中阳性表达率(57.7%)显著高于Ⅲ+Ⅳ期(21.4%),差异有统计学意义(P=0.029)。Galectin-3在5例正常胸腺组织中表达比较微弱,在16例A+AB型胸腺瘤患者中有7例(43.8%)阳性表达。在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有14例(82.4%)阳性表达。在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达。Galectin-3在Masaoka分期Ⅰ+Ⅱ期患者中阳性表达率(53.8%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(53.8%),差异有统计学意义(P=0.012)。Ki-67在5例正常胸腺组织中基本无一例阳性表达,在16例A+AB型胸腺瘤患者中有8例(50.0%)阳性表达。在17例B1+B2型胸腺瘤患者中有15例(88.2%)阳性表达。在7例B3型胸腺瘤患者中有6例(85.7%)阳性表达。Ki-67在Masaoka分期Ⅰ+Ⅱ期患者中阳性表达率(61.5%)显著低于Ⅲ+Ⅳ期(92.9%),差异有统计学意义(P=0.034)。4结论(1) PTEN的失表达、Galectin-3和Ki-67过度表达与胸腺瘤发生、发展及恶变的过程呈显著相关,检测胸腺组织中PTEN、Galectin-3和Ki-67表达对胸腺瘤的早期诊断及治疗有重要的意义。(2) PTEN、Galectin-3和Ki-67表达与胸腺瘤的临床分期及分型相关,检测胸腺组织中PTEN、Galectin-3和Ki-67表达有助于判断胸腺瘤的临床分期、恶性程度及复发。(3) PTEN与Galectin-3、Ki-67的表达呈负相关,PTEN可能通过调控Galectin-3及Ki-67表达,抑制胸腺瘤浸润和转移；Galectin-3与Ki-67呈正相关,两者在胸腺瘤的发生、发展及恶变的过程中起协同作用。(4) Galectin-3在不同分期胸腺瘤组织中的表达不同,表明Galectin-3参与胸腺瘤的发生、发展、恶变及转移,为胸腺瘤的深入研究提供了方向。