应力介导的细胞凋亡在扩张鼠腭中缝组织改建过程中的作用研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lhasrq
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第一部分扩张力作用下大鼠腭中缝组织形态学和成骨现象的观察目的观察扩张力作用下大鼠腭中缝牵张成骨的组织形态学变化及新骨形成情况,了解扩弓后腭中缝组织的反应和新骨形成方式。方法选用4周龄健康雄性wistar大鼠55只,随机分为11组,实验组5组、对照组6组,采用自制两眼簧后牙扩弓器扩张大鼠上颌腭中缝组织,固位臂插入上颌第一、二磨牙邻接点以下,初始力值50 g,2 d后加力一次,4 d后以正畸用树脂粘固扩弓器两眼簧,固定期为1周。分别于0 d、扩弓1 d、2 d、4 d后,固定3 d(实验7 d)、固定7 d(实验11 d)后取材,标本常规进行脱钙、石蜡包埋和组织切片,石蜡切片行常规HE染色、Masson三色染色、骨钙素(OCN)免疫组化。结果扩张1 d后即可见腭中缝明显增宽,中央受牵拉的间充质样细胞层的排列方向与扩张力方向一致,并可见成骨细胞的分化和成纤维细胞的增殖;扩张2 d和4 d后可见成骨细胞和成纤维细胞大量增殖,软骨细胞带外侧有新骨沉积;固定3 d后可见大量增殖细胞沿着两侧骨缘内排列,骨缝边缘内外侧均有新骨沉积;固定7 d后,可见两侧陈旧的软骨细胞带内侧有大量类骨质形成,两侧骨缘呈指状嵌合。结论扩张的腭中缝新骨改建主要发生在腭中缝骨缘,并由软骨内成骨的方式向膜内成骨方式进行转变,即在生理状态下及扩张期的成骨方式均为软骨内成骨,而固定期的成骨方式则为膜内成骨。第二部分扩张力作用下大鼠腭中缝组织改建过程中细胞凋亡现象的变化目的观察扩张力作用下大鼠腭中缝组织在扩张期和固定期细胞凋亡现象的变化规律,并探讨细胞凋亡在腭中缝组织改建新骨形成过程中的作用。方法选用4周龄健康雄性Wistar大鼠55只,随机分为11组,实验组5组、对照组6组,采用自制两眼簧后牙扩弓器扩张大鼠上颌腭中缝组织,固位臂插入上颌第一、二磨牙邻接点以下,初始力值50 g,2 d后加力一次,4 d后以正畸用树脂粘固扩弓器两眼簧,固定期为1周。分别于0 d、扩弓1 d、2 d、4 d后,固定3 d(实验7 d)、固定7 d(实验11 d)后取材,标本常规进行脱钙、石蜡包埋和组织切片,并用TUNEL荧光标记法检测凋亡细胞。结果扩弓1 d后,实验组细胞凋亡现象明显多于对照1 d组;扩弓2 d后实验组凋亡细胞有所减少,但仍多于对照2 d组;扩弓4 d后实验组凋亡细胞数比扩弓2 d实验组有所增加,且明显多于对照4 d组;固定3d后凋亡细胞数明显减少,与对照7 d组差异不显著,固定7 d后实验组与对照组骨缝边缘及附近骨组织内凋亡细胞的量和分布无明显差异,但在细胞增殖区可见凋亡细胞平行相伴。结论上颌腭中缝扩大产生的机械牵张力改变了腭中缝组织的细胞凋亡水平,细胞凋亡在扩张力作用下的腭中缝组织改建新骨形成过程中有着重要的生物学意义。
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