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目的:
调控C6胶质瘤细胞AQP4表达水平,建立不同AQP4表达水平的大鼠C6胶质瘤模型,研究MRI扩散成像参数与大鼠C6胶质瘤细胞AQP4的量化关系,探讨基于MRI扩散成像监测大鼠胶质瘤AQP4的表达水平。
方法:
构建C6胶质瘤细胞AQP4过表达、沉默稳转细胞株,调控AQP4表达水平,验证各组细胞的增殖和侵袭能力。选取15只雄性SD大鼠,250-300g/只,将对数期生长的C6胶质瘤细胞(AQP4过表达、沉默及未干扰细胞株)采用立体定位技术分别接种在大鼠右侧纹状体部位,从而建立3组大鼠原位C6细胞胶质瘤模型(AQP4过表达组、AQP4沉默组、AQP4未干扰组)。所有大鼠于造模后2-3周内行MRI扩散成像(DWI、DTI、DKI及多b值DWI成像)和平扫及增强MRI检查,后处理软件获取各扩散成像参数值。检查完成后获取完整大鼠脑组织,行H&E染色及免疫组化染色,检测各组胶质瘤瘤体及瘤周AQP4蛋白的表达水平。分析MRI扩散参数值,研究MRI扩散成像参数值与胶质瘤瘤体及瘤周AQP4表达水平的相关性。
结果:
1.携带AQP4过表达及沉默基因的病毒成功侵染C6胶质瘤细胞。AQP4过表达组C6细胞增殖率明显高于AQP4未干扰组及AQP4沉默组(P值均<0.05)。与AQP4未干扰组及AQP4沉默组相比,AQP4过表达组侵袭的细胞数明显增加(P值均<0.05)。
2.AQP4过表达组肿瘤最大径明显大于AQP4沉默组及AQP4未干扰组(P值均<0.05),且出血及坏死囊变增多,水肿程度严重,病灶强化明显。肿瘤边界是否清楚在各组间无明显差异(P=0.568)。
3.肿瘤瘤体ADC值明显小于瘤周(P<0.001),瘤体MK值、Kr值及ADCuh值明显高于瘤周(P值均<0.05),肿瘤瘤体及瘤周的MD值、FA值及Ka值无明显差异。三组间肿瘤瘤体MD值、FA值、Kr值、Ka值均无明显差异,AQP4过表达组MK值及ADCuh值明显高于AQP4未干扰及沉默组(P值均<0.05),AQP4过表达组ADC值与AQP4未干扰组无明显差异(P=0.306),但明显低于AQP4沉默组(P=0.008)。三组间肿瘤瘤周ADC值、MD值、FA值、MK值、Kr值、Ka值均无明显差异,AQP4过表达组ADCuh值与AQP4未干扰组无明显差异(P=0.199),但均明显高于AQP4沉默组(P值均<0.05)。
4.相关分析示:瘤体ADC值与AQP4表达呈负相关(r=-0.599,P=0.031)。MK值、ADCuh值与AQP4表达呈显著正相关(r=0.711,P=0.006;r=0.852,P<0.001);瘤周MK值、ADCuh值与AQP4表达均呈正相关(r=0.637,P=0.019;r=0.768,P=0.002);瘤周ADC值与瘤周肿瘤细胞密度呈负相关(r=-0.577,P=0.039),瘤周ADCuh值与瘤周肿瘤细胞密度呈正相关(r=0.652,P=0.016)。
结论:
1、AQP4过表达及沉默mRNA在细胞内成功转录,并且成功调节AQP4蛋白在细胞内的表达水平。AQP4的表达水平影响C6胶质瘤细胞的增殖及侵袭能力,AQP4过表达对C6胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力方面起促进作用。
2、瘤周肿瘤细胞浸润密度与DWI参数ADC值呈负相关、与多b值DWI参数ADCuh值呈正相关,ADC值及ADCuh值可以用来反映瘤周肿瘤细胞密度。瘤体及瘤周DKI参数MK值和多b值DWI参数ADCuh值与AQP4表达均显示较高的正相关性,瘤体DWI参数ADC值与AQP4表达呈负相关性,应用MRI扩散成像技术能够监测C6胶质瘤AQP4的表达水平,有助于反映肿瘤细胞浸润的信息。
调控C6胶质瘤细胞AQP4表达水平,建立不同AQP4表达水平的大鼠C6胶质瘤模型,研究MRI扩散成像参数与大鼠C6胶质瘤细胞AQP4的量化关系,探讨基于MRI扩散成像监测大鼠胶质瘤AQP4的表达水平。
方法:
构建C6胶质瘤细胞AQP4过表达、沉默稳转细胞株,调控AQP4表达水平,验证各组细胞的增殖和侵袭能力。选取15只雄性SD大鼠,250-300g/只,将对数期生长的C6胶质瘤细胞(AQP4过表达、沉默及未干扰细胞株)采用立体定位技术分别接种在大鼠右侧纹状体部位,从而建立3组大鼠原位C6细胞胶质瘤模型(AQP4过表达组、AQP4沉默组、AQP4未干扰组)。所有大鼠于造模后2-3周内行MRI扩散成像(DWI、DTI、DKI及多b值DWI成像)和平扫及增强MRI检查,后处理软件获取各扩散成像参数值。检查完成后获取完整大鼠脑组织,行H&E染色及免疫组化染色,检测各组胶质瘤瘤体及瘤周AQP4蛋白的表达水平。分析MRI扩散参数值,研究MRI扩散成像参数值与胶质瘤瘤体及瘤周AQP4表达水平的相关性。
结果:
1.携带AQP4过表达及沉默基因的病毒成功侵染C6胶质瘤细胞。AQP4过表达组C6细胞增殖率明显高于AQP4未干扰组及AQP4沉默组(P值均<0.05)。与AQP4未干扰组及AQP4沉默组相比,AQP4过表达组侵袭的细胞数明显增加(P值均<0.05)。
2.AQP4过表达组肿瘤最大径明显大于AQP4沉默组及AQP4未干扰组(P值均<0.05),且出血及坏死囊变增多,水肿程度严重,病灶强化明显。肿瘤边界是否清楚在各组间无明显差异(P=0.568)。
3.肿瘤瘤体ADC值明显小于瘤周(P<0.001),瘤体MK值、Kr值及ADCuh值明显高于瘤周(P值均<0.05),肿瘤瘤体及瘤周的MD值、FA值及Ka值无明显差异。三组间肿瘤瘤体MD值、FA值、Kr值、Ka值均无明显差异,AQP4过表达组MK值及ADCuh值明显高于AQP4未干扰及沉默组(P值均<0.05),AQP4过表达组ADC值与AQP4未干扰组无明显差异(P=0.306),但明显低于AQP4沉默组(P=0.008)。三组间肿瘤瘤周ADC值、MD值、FA值、MK值、Kr值、Ka值均无明显差异,AQP4过表达组ADCuh值与AQP4未干扰组无明显差异(P=0.199),但均明显高于AQP4沉默组(P值均<0.05)。
4.相关分析示:瘤体ADC值与AQP4表达呈负相关(r=-0.599,P=0.031)。MK值、ADCuh值与AQP4表达呈显著正相关(r=0.711,P=0.006;r=0.852,P<0.001);瘤周MK值、ADCuh值与AQP4表达均呈正相关(r=0.637,P=0.019;r=0.768,P=0.002);瘤周ADC值与瘤周肿瘤细胞密度呈负相关(r=-0.577,P=0.039),瘤周ADCuh值与瘤周肿瘤细胞密度呈正相关(r=0.652,P=0.016)。
结论:
1、AQP4过表达及沉默mRNA在细胞内成功转录,并且成功调节AQP4蛋白在细胞内的表达水平。AQP4的表达水平影响C6胶质瘤细胞的增殖及侵袭能力,AQP4过表达对C6胶质瘤细胞的增殖、侵袭能力方面起促进作用。
2、瘤周肿瘤细胞浸润密度与DWI参数ADC值呈负相关、与多b值DWI参数ADCuh值呈正相关,ADC值及ADCuh值可以用来反映瘤周肿瘤细胞密度。瘤体及瘤周DKI参数MK值和多b值DWI参数ADCuh值与AQP4表达均显示较高的正相关性,瘤体DWI参数ADC值与AQP4表达呈负相关性,应用MRI扩散成像技术能够监测C6胶质瘤AQP4的表达水平,有助于反映肿瘤细胞浸润的信息。