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水稻稻瘟病(Magnaporthe grisea)是一种世界性真菌病害,对全球水稻生产造成极大危害。寻求对病害的生物防治方法对人类社会的可持续发展有着特殊的意义。本论文以枯草芽孢杆菌(B.subtilis)B-332菌株(以下简称B-332)及其产生的抗菌物质为研究对象,通过从室内到田间的一系列实(试)验,对该菌株对稻瘟病(菌)的生防作用和抑菌机理进行了较为系统地研究。结果如下: 1、在离体条件下,对稻瘟病菌的菌丝生长、孢子萌发和致畸作用等方面进行了研究,结果发现,B-332对稻瘟病菌表现出了强烈的抑制作用。抑菌带宽平均可达23.69mm;发酵上清液稀释5×和10×时对菌丝生长的抑制率在92%以上;5×、10×和20×稀释液对病菌分生孢子萌发的抑制率为100%。在发现对芽管有致畸作用后,对致畸率进行了测定。发现发酵上清液稀释至100~200×时对芽管的致畸率最高,在70%以上,至2000×时仍有致畸作用。 2、盆栽水稻活体生物测定中,B-332的芽孢菌体悬浮液及发酵上清液均表现出较好的防治效果(50%以上);当菌液与上清混合后其防治效果有加和作用;该菌株对稻瘟病的防治作用主要在预防,其预防叶瘟的效果与接种稻瘟病菌时叶面已定殖的B-332菌株的数量有关;在人工大量引入的情况下,该菌能够在水稻叶面上有效定殖,第21天还能够检测到一定量的活菌,并且在叶面有10%病斑的情况下,菌量会更多。田间试验结果表明,芽孢浓度在1×10~8cfu/mL时,该菌株对水稻穗颈瘟的防治效果达57.2%,增产率达9.6%,且浓度在5×10~8cfu/mL时对螃蟹乃无毒性。 3、通过显微镜观察发现,B-332菌株对稻瘟病菌的抑制作用主要表现在对芽管及菌丝体的致畸作用,经上清液处理的芽管和菌丝成球形膨大状,最终导致细胞质外泄、细胞崩溃。这种致畸作用导致的畸形芽管,进而不能形成正常的附着胞。透射电镜观察进一步发现,经上清处理后,稻瘟病菌的细胞外壁有被溶解的现象。 4、对B-332菌株发酵上清液中的抑菌物质进行了粗提。粗提物在浓度为1.00μg/mL时即对稻瘟病菌有明显的抑制作用,并且有很好的热稳定性。粗提物5×浓缩液对稻瘟病的实际防治效果达72.63%,好于对照药剂三环唑。