背景：Axin是1997年鉴定的一个胚胎发育调节因子，它通过负性调节Wnt信号通路，在动物胚胎体轴形成过程中起重要作用。后来发现Axin还是一个肿瘤抑制因子。Wnt信号通路的异常与髓母细胞瘤、肝细胞肝癌、肝母细胞瘤及原始神经外胚叶肿瘤的发生相关。已经在人髓母细胞瘤、肝细胞肝癌、肝母细胞瘤及乳腺癌中检测到了Axin基因的突变。此外，Axin还参与激活JNK信号通路，调节细胞凋亡。 直肠癌及星型细胞肿瘤是人类常见的恶性肿瘤。对Axin是否同直肠癌及星型细胞肿瘤的发生相关还未见报道。同其它肿瘤一样，星型细胞肿瘤和直肠癌的发生是个多因素、多步骤、多阶段的过程，其中可能存在多种原癌基因的激活，抑癌基因的失活，因此对抑癌基因Axin在上述肿瘤中的研究，将有助于进一步探讨肿瘤的发病机理，从而对肿瘤的预防和治疗提供理论依据。 目的：(1)检测Axin基因在直肠癌及星型细胞肿瘤中的突变，从而在DNA水平上推测Axin基因突变在上述肿瘤发生中的作用并为进一步研究Axin的功能提供依据；(2)检测Axin蛋白在星型细胞肿瘤中的表达，研究Axin蛋白表达同星型细胞肿瘤之间的关系以及Axin基因突变对蛋白表达的影响。同第四军医大学硕士学位论文时检测p一连环素(p一catenin)在星型细胞肿瘤中的表达。因为p一catenin是Axin作用的一个靶蛋白，也是wnt信号转导通路的关键分子，所以通过观察Axin和p一catenin在星型细胞肿瘤中的表达，推测Axin的作用途径是否同p一catenin及wnt信号通路相关。 方法:(1)采用PCR一SSCP，基因亚克隆，测序等方法检测了51例直肠癌中Axin基因全部编码区的突变及28例星型细胞肿瘤中Axin基因8、9、10三个外显子的突变。5份正常人血作为对照;(2)采用免疫组化SABC法检测28例星型细胞肿瘤组织中Ax in和p一catenin的表达，结果进行统计学分析。 结果:(1) SSCP分析发现，51例直肠癌中共有26例样本及1例对照样本中出现差异带。序列分析结果显示出现差异带的26例直肠癌样本中有18例的突变位于内含子4的第17个核普酸上，另外8个突变中4个为错义突变，分别是K203M、N307K、H394N和E852G，l个为无义突变即Y305一终止密码，另外3个是同义突变。K203M表示第203位赖氨酸(K)变成了蛋氨酸(M)。这些突变位于Axin基因外显子1、2、4、6和10上。发生错义及无义突变的5例(10%)样本中4例为直肠高分化腺癌，1例为猫液腺癌;(2)28例星型细胞肿瘤中，Axin基因外显子10中共检测到3处错义突变，发生在6例样本(21.4%)中，分别是:3例V836M、2例R84lQ及1例D862N。突变样本包括W级2例，m级3例，n级1例。此外，还检测到3处同义突变;(3)正常脑组织中Axin在神经元胞浆表达阳性，神经胶质细胞表达阴性;Axin在近30%(8/28)星型细胞肿瘤中表达;统计学分析(Pearson ehi一square)表明Axin蛋白表达与星型细胞肿瘤的分级无明显关系;突变的样本中有1例Axin表达阳性;(4)星型细胞肿瘤中，有2例m级肿瘤细胞中表达p一catenin，定位于胞浆。其中有1例同时表达Axin和p一catenin。第四军医大学硕士学位论文 结论:(1)在51例直肠癌中我们检测到5处可能引起氨基酸改变的Axin基因突变。Axin基因突变可能会影响蛋白质的结构功能，导致Axin不能行使正常的生物学功能，因此Axin基因的突变可能与部分直肠癌发生相关，该结果也为下一步研究这些突变如何引起Axin功能改变提供了研究基础;(2)同理，Ax in基因突变可能与部分星型细胞肿瘤的发生相关;(3) Axin在正常神经胶质细胞中无表达而在大约3既星型细胞肿瘤的瘤细胞胞浆中异常表达，提示Axin可能与星型细胞肿瘤有关;(4)Axin是否通过p一catenin及Wnt信号通路在星型细胞肿瘤中起作用，还有待于进一步研究。