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目的1 .分析并评估垂体柄中断综合征(pituitary stalk interruption syndrome,PSIS)患者生长激素替代治疗的临床疗效。2.探讨临床表现典型的散发PSIS患者的突变情况,寻找可能致病基因和位点,为未来该症候群的临床诊断、基因治疗及遗传咨询提供依据。3.分析通过全基因组重测序捕获的一具有垂体柄中断综合征患儿及其直系家庭成员的基因突变谱。4.探讨候选基因对人胚胎干细胞生物学特性及垂体发育相关通路的关键蛋白LHX3、PITX1的影响。方法1.回顾性分析我科2004年以来收治的75例PSIS合并矮身材患者的临床特征、生化检查、内分泌功能实验、影像学特征,以及生长激素用药史、身高、身高增长情况。2.运用全外显子组测序技术对我院24例散发的临床症状典型的垂体柄中断综合征患者进行基因突变分析。3.运用全基因组重测序技术对一具有垂体柄中断综合征患儿及其直系家庭成员进行基因谱分析。4.对候选基因进行分子水平验证,在人胚胎干细胞(H1)将候选基因NBPF9、MUC12、TYWIB沉默表达,观察细胞形态变化,用CCK8法测细胞活性,并用western blot法测定垂体发育相关通路上的关键蛋白LHX3、PITX1的表达水平。结果1. 75例患者中,51例接受生长激素治疗的最终身高(SDS)由-1.99 ± 1.91(-6.93～2.80)增长至-1.47 ± 1.64 (-7.82～1.05) (P = 0.016)。治疗组的身高增长0.55 (-4.55～6.46)高于非治疗组的24例患者0.34(-4.53～5.90)(P=0.011)。不同治疗时间得到的身高增长之间具有统计学差异(P = 0.001): GH0 vs. GH 3, P = 0.000;GH 1 vs. GH 3, P = 0.028; GH 2 vs.GH 3, P = 0.044。2.通过测序发现约5 3 00余个突变,包括4500余个SNP及800余个InDel,梳理分析得到41个高频突变基因富集在垂体发育相关的3条主要通路上,包括WNT/β-catenin 通路、Notch 信号通路以及 Sonic Hedgehog(Shh)通路。3.通过全基因组测序,得到患者及其家庭成员结构变异、拷贝数变异等情况,并通过一代验证,筛选出候选基因。4.NBPF9、MUC12沉默表达的细胞活性有所下降,在蛋白水平,NBPF9沉默表达后LHX3表达下降,PITX1未见明显改变。结论1.用药患者终身高高于未用药患者,并且获得更多的身高增长,这一效应在持续用药12个月时可以出现。尽管在发展中国家,PSIS的诊断有所延迟,即使如此,生长激素在成年患者中的应用依旧有效。2.垂体柄中断综合征(PSIS)病因学复杂,可能有多个基因参与。3.根据患者特有突变及突变类型,筛选出候选基因NBPF9、MUC12、TYW1B。4. NBPF9沉默表达后,人胚胎干细胞垂体发育相关基因LHX3蛋白水平表达下降,具体机制有待进一步探讨。