125I粒子对胆管细胞癌HCCC-9810细胞Livin基因表达及细胞凋亡的影响

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目的  观察不同放射性活度125I粒子对胆管细胞癌HCCC-9810细胞Livin基因表达的干扰效应及对细胞凋亡的影响,拟进一步探讨Livin因子与胆管细胞癌放射抵抗性间的相关性。  方法  实验分为五组:空白组、空壳组、0.5mCi125I粒子组、0.7mCi125I粒子组、0.9mCi125I粒子组。体外培养胆管细胞癌HCCC-9810细胞,实验组经相应放射性活度125I粒子干预48小时后,通过免疫组化法、蛋白印迹法(Westernblot)及实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测各组细胞Livin蛋白及LivinmRNA的表达水平,同时应用流式细胞术(FCM)检测各组细胞凋亡率的变化。  结果  与空白组比较,空壳组胆管细胞癌HCCC-9810细胞的Livin蛋白、LivinmRNA的表达及细胞凋亡率未见明显差异(p>0.05);与空白组及空壳组比较,0.5mCi125I粒子组、0.7mCi125I粒子组、0.9mCi125I粒子组三组实验组胆管细胞癌HCCC-9810细胞的Livin基因的表达及细胞凋亡率存在显著差异(p<0.05)。0.5mCi125I粒子组胆管细胞癌HCCC-9810细胞的Livin蛋白、LivinmRNA的表达水平最低而细胞凋亡率最大,0.7mCi125I粒子组胆管细胞癌HCCC-9810细胞的Livin蛋白、LivinmRNA表达水平最高,细胞凋亡率最低,0.9mCi125I粒子组胆管细胞癌HCCC-9810细胞的Livin蛋白、LivinmRNA的表达水平及细胞凋亡率介于两者之间。  结论  125I粒子能诱导胆管细胞癌HCCC-9810细胞的细胞凋亡和影响其细胞因子Livin的表达,且不同剂量间存在差异。胆管细胞癌具有放射抵抗性,且Livin作为凋亡抑制基因,其表达水平的高低可能与肿瘤细胞的放射抵抗性存在一定的相关性。
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