【摘 要】
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肝细胞癌（肝癌,HCC）作为一种常见的恶性肿瘤之一,目前临床主要的治疗方法是手术兼化疗,但缺点是术后极易复发,且毒副作用明显,因此从天然产物中寻找安全有效且低毒的抗癌活性成分迫在眉睫。大白桩菇（Leucopaxillus giganteus）作为一种药食同源的真菌,味道鲜美、口感细嫩。研究表明其具有多种活性,如抗氧化、抗肿瘤、抗菌等。多糖作为其主要活性成分之一,已成为学者研究热点内容之一。目前关于
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肝细胞癌（肝癌,HCC）作为一种常见的恶性肿瘤之一,目前临床主要的治疗方法是手术兼化疗,但缺点是术后极易复发,且毒副作用明显,因此从天然产物中寻找安全有效且低毒的抗癌活性成分迫在眉睫。大白桩菇（Leucopaxillus giganteus）作为一种药食同源的真菌,味道鲜美、口感细嫩。研究表明其具有多种活性,如抗氧化、抗肿瘤、抗菌等。多糖作为其主要活性成分之一,已成为学者研究热点内容之一。目前关于大白桩菇多糖抗肿瘤活性的研究鲜有报道,本研究以大白桩菇为原料,采用冷水提取法（4℃）提取纯化出一种均一性多糖（LGP）,并对其基本结构和体内抗肿瘤活性进行了研究。本研究通过单因素和响应面优化试验确定大白桩菇粗多糖最佳提取工艺条件为料液比1:22,提取时间25 h,提取次数3次,醇沉浓度70%,在此条件下大白桩菇粗多糖得率为4.45±0.23%。粗多糖经过Sevage法脱蛋白,透析,Sephadex G-200分离纯化得到大白桩菇纯多糖,命名为LGP。实验测得的可溶性总糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为92.76±0.98%、3.36±0.65%和2.80±0.73%,还原糖未检出。通过高效液相色谱仪测得其分子量为1.78×10~6 Da。通过离子色谱分析可知LGP由岩藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为0.853:0.438:2.568:1:1.209:0.135:0.030。其中,岩藻糖、半乳糖、葡萄糖和木糖含量相对较高。红外光谱和核磁共振结果表明LGP的主链中含有α-D-Glu、α-D-Xyl、α-D-Gal、α-L-Fuc。通过扫描电子显微镜可知LGP表面粗糙疏松,呈现片层堆叠。X-衍射和热重分析结果表明LGP结晶度较低且热解过程主要经历三个阶段。刚果红实验和圆二色光谱分析表明LGP含有螺旋结构。通过建立H22荷瘤小鼠模型,研究大白桩菇多糖体内抗肿瘤活性,结果表明:大白桩菇多糖能有效保护免疫器官的正常功能,以剂量依赖性的方式抑制H22实体肿瘤的生长,使荷瘤小鼠细胞周期阻滞在S期,且可能通过线粒体凋亡通路诱导H22荷瘤小鼠细胞的凋亡,从而抑制肿瘤的恶性增殖。综上所述,本研究为大白桩菇多糖作为一种潜在的抗癌药物以及在食品领域的应用提供理论基础。
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