论文部分内容阅读
目的：川崎病(Kawasaki Disease,KD)并发冠状动脉病变(coronary artery lesion,CAL)和心肌损伤(myocardial injury,)严重威胁患儿的生命和生存质量,已经成为儿童获得性心脏病的主要原因。KD的诊断目前尚缺乏特异性的手段,寻找客观的生化和影像学指标早期预测、发现心肌损伤和CAL并加以积极预防一直是KD研究的热点。研究证实,在动脉损伤中,细胞外基质(ECM)的破坏是造成冠脉扩张、冠脉瘤形成以及冠脉狭窄的病理基础,而基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)在细胞外基质的降解中起到重要作用。近几年还发现糖原磷酸化酶同工酶BB(Human Glycogen phosphorylase BB,GPBB)和N末端脑利钠肽(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)是两种与心肌损伤有关的生化标志物。本研究的目的：1.探讨KD患儿血浆NT-proBNP和GPBB水平的动态变化在判断KD心肌损伤和预测CAL中的价值。2.探讨MMPs中的MMP-2和组织基质金属蛋白酶抑制物(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)中的TIMP-2在川崎病患儿外周血的表达水平,并且观察在此过程中MMP-2和TIMP-2对于CAL的影响。方法：实验组40例KD患儿,常规超声心动图观察冠状动脉病变确定其中发生CAL患儿13例,未发生CAL患儿27例。分别测定急性期KD患儿的外周血白细胞计数(white blood count,WBC)、C反应蛋白(C reactive protein, CRP)、血沉(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、血清心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I, CtnⅠ)、肌酸激酶同工酶(creation kinase isoenzymeCK-MB)和急性期与恢复期的血小板计数(platlet count, PLT),在急性期和恢复期各抽取一次外周静脉血,双抗体酶联免疫吸附法(enzyme-linked immumodsordent assay, ELISA)测定GBPP和NT-proBNP水平,MMP-2和TIMP-2的蛋白水平,并测算MMP-2/TIMP-2比值,采取明胶酶谱法测定MMP-2在血清中的活性。对照组为20例正常体检儿童,体检当日超声检测项目同KD患儿,检测外周血白细胞计数、C反应蛋白和血沉,同时检测GBPP和NT-proBNP水平,MMP-2和TIMP-2的蛋白水平和MMP-2的活性。结果：1.在KD患儿急性期血浆NT-proBNP水平为(1306.55±658.08)ng/L,而正常对照组儿童血浆NT-proBNP水平为(119.07+50.45)ng/L,两组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。KD患儿恢复期血浆NT-proBNP水平为(388.43±228.67)ng/L,较急性期显著降低(P<0.01)。KD急性期内,有CAL组血浆NT-proBNP水平为(1968.37±466.92)ng/L,高于无CAL组的(544.28+245.09)ng/L,比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.在KD患儿急性期血浆GBPP水平为(18.12±8.24)ng/L,而正常对照组儿童血浆GBPP水平为(8.28±3.99)ng/L,两组相比差异具有统计学意义(P<0.01),KD患儿恢复期血浆GBPP水平为(31.14±13.71)ng/L,较急性期显著升高(P<0.01)；KD急性期内,有CAL组血浆GBPP水平为(26.04±5.81)ng/L,高于无CAL组的(12.84±4.50)ng/L,比较差异有统计学意义(P<0.01)；在KD组内无论有无CAL,急性期与恢复期血浆GBPP水平均与血小板计数呈正相关(r=0.678,P=0.015；r=0.646,P=0.023)。3.急性期KD患儿合并CAL组血清中MMP-2的活性,蛋白水平,TIMP-2的蛋白水平和MMP-2/TIMP-2的比值分别为11.49±4.01、675.4±171.6ng/ml、356.6±80. Ong/ml、1.96,无CAL组的分别为9.33±2.99、407.1±164.5ng/ml、274.1±80.1ng/ml、1.61,有CAL组的MMP-2的活性、蛋白水平、TIMP-2的蛋白水平、MMP-2/TIMP-2的比值均比无CAL组的增高(P<0.05),正常对照组儿童的MMP-2活性、蛋白水平和TIMP-2以及MMP-2/TIMP-2分别为2.21±0.92、164.5±49.8ng/ml、130.1±43.2ng/ml、1.24,较川崎病患儿的急性期和恢复期的数据均明显降低(P＜0.01)。结论：1.KD患儿急性期血浆NT-proBNP水平的升高可能与心肌炎症及心室壁局部应力改变有关。血浆NT-proBNP水平可作为KD是否发生CAL的独立预测因素。2.KD患儿急性期血浆GPBB水平的升高可能与急性期KD患儿的心肌缺血、缺氧有关。在KD恢复期,血浆GPBB水平进一步升高表明静脉输注IVIG对纠正免疫紊乱和控制炎症效果明显,但短期内对改善心肌缺血、缺氧并无效果。3.在川崎病患儿的外周血中,MMP-2活性和蛋白水平都明显升高,TIMP-2表达也增高,表明MMP-2在川崎病的发病机制中起到了一定的作用,参与了冠脉基质降解,导致血管基质重构。而TIMP-2作为MMP-2的抑制剂,可能参与了MMP-2的活性调控,从而缓解冠脉损伤的发生。MMP-2/TIMP-2复合物比例的失衡可能预示冠脉损伤的几率大大增大。