杨梅（Myrica rubra Sieb.et Zucc.）为杨梅科（Myricaceae）杨梅属（Myrica）的多年生常绿乔木,在我国南方地区广泛种植。杨梅枝条中含有多种次生代谢产物,具有较高的药用价值,此外,杨梅栽培过程中,果农每年需要对树体进行修剪,随着种植区域和面积不断扩展,造成了一定的资源浪费,枝条的潜在利用价值有待深入研究。本课题以’荸荠种’（BQ）、’早佳’（ZJ）、’东魁’（DK）品种的杨梅枝条为实验材料,采用70%乙醇和超声波辅助法提取有效成分,经石油醚脱脂后,依次用乙酸乙酯和正丁醇进行分级萃取,分别得到三个品种杨梅枝条乙酸乙酯相（EA）、正丁醇相（NB）、水相（AP）的产物。利用UPLC-ESI-MS/MS分析方法对分级相产物进行定量与定性分析,利用超氧阴离子法、DPPH法、ABTS法等三种不同评价方法测定提取物的抗氧化活性;以HepG2人肝癌细胞细胞、A375人黑色素瘤细胞为模型,通过MTT检测、PI检测、Annexin V-FITC/PI检测、q RT-PCR检测、Western blotting法、免疫荧光等方法分析提取物的抗肿瘤活性。其主要结果如下:1.杨梅枝条醇提物分级相中次生代谢产物的定量、定性分析与抗氧化性研究UPLC-ESI-MS/MS分析显示,代谢物质含量为:EA（17734.73μg/g）＞NB（9643.69μg/g）＞AP（4028.37μg/g）;种类为:EA（89种）＞NB（70种）＞AP（39种）。杨梅枝条醇提物中含有苯甲酸及其衍生物、黄烷醇、黄酮醇、萜类、苯丙素类、芳香醛类等20类代谢物质,共92种。BQ、ZJ、DK杨梅枝条醇提物的EA、NB和AP在三种不同抗氧化性评价方法中均表现出较好的自由基清除能力,呈浓度依赖关系。在相同品种和浓度下,EA与NB、AP相较,大体上表现出更强的抗氧化性。相同分级相和浓度的BQ、ZJ、DK品种清除·O2-、DPPH·、ABTS·+的能力存在不同程度的差异。2.杨梅枝条醇提物诱导HepG2人肝癌细胞凋亡的机制研究使用浓度为100、200、300、400μg/m L的醇提物处理HepG2细胞,在48 h检测其细胞抑制率,依次为5.57±0.06%、21.34±0.17%、45.52±1.15%、65.51±1.73%,呈浓度依赖关系;显微镜下观察细胞形态,随着醇提物浓度增加,细胞胞质皱缩、贴壁性减弱、间隙增大,HepG2细胞的生长受到抑制。PI和Annexin V-FITC/PI法结果显示,当浓度为400μg/m L时,S期细胞比率为59.73±1.73%,极显著高于对照组12.13±0.58%,细胞凋亡率为64.37%显著高于对照组7.36%,说明醇提物具有阻滞细胞周期、促进细胞凋亡的作用。400μg/m L醇提物处理HepG2细胞48h后,在转录水平上可显著上调P21,下调Smad4、P53、E2F1、Cyclin A/B/C/D/E、CDK2/3/4/5/6/7相关细胞周期基因,显著下调Bad、Bid、Bcl-2、Bcl-xl、ERK1相关细胞凋亡基因。Western blotting和免疫荧光实验结果进一步显示,醇提物可能通过p21-Cyclin-CDKs信号通路调控细胞周期、Raf-MEK1-ERK1信号通路与Bcl-2的共同作用,促使HepG2细胞凋亡。3.杨梅枝条醇提物诱导A375人黑色素瘤细胞凋亡的机制研究使用浓度为100、200、300、400μg/m L的醇提物处理A375细胞,在48 h检测其细胞抑制率,依次为3.31±0.06%、16.42±0.06%、32.37±0.12%、49.46±0.17%,呈浓度依赖关系;显微镜下观察细胞形态,随着醇提物浓度增加,细胞胞质皱缩、贴壁性减弱、间隙增大,A375细胞的生长受到抑制。PI法结果显示,当浓度为200μg/m L时,S期细胞比率为16.64±0.58%,极显著高于对照组8.83±0.12%,说明醇提物将细胞阻滞在S期;Annexin V-FITC/PI法结果显示,当浓度为400μg/m L时,细胞凋亡率为36.44%显著高于对照组3.9%,说明醇提物促进细胞凋亡。提取物作用细胞48h后,在转录水平上可显著上调P21,下调Smad4、P53、E2F1、Cyclin A、Cyclin B、Cyclin C、Cyclin D、CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6等细胞周期相关基因,显著下调Bad、Bid、Bcl-xs、Bak、Bcl-w、Raf等细胞凋亡相关基因。