淋巴道的转移是乳腺癌常见的转移途径,也是影响患者预后的重要因素,但淋巴转移的途径和机制尚不清楚.一些研究表明淋巴管生成可能在恶性肿瘤的淋巴道转移及其发生、发展过程中起重要的作用.然而,由于缺乏特异性很好的淋巴管标记物来识别淋巴管,长期以来人们一直把注意力放在血管生成的研究上,并没有对肿瘤的淋巴道转移进行深入的研究.近年来,随着血管内皮生长因子-C(vascular endottlelial growth factor-C,VEGF-C)和一些新的特异性强的淋巴管内皮标记物的发现,淋巴管生成成为新的研究热点.VEGF-C是目前已知的最主要的肿瘤淋巴管生成因子,可诱导淋巴管的生成和扩张,其表达的强度与局部淋巴结转移密切相关.环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)是花生四烯酸代谢中的重要限速酶,在包括乳腺癌在内的多种人类恶性肿瘤中过度表达,通过多种机制参与肿瘤的发生、发展和转移.但目前人们对COX-2在肿瘤转移中的作用多集中在其对微血管的影响上,而对肿瘤淋巴管生成的作用却研究甚少.最近有研究表明COX-2可能通过上调VEGF-C的表达在恶性肿瘤的淋巴管生成和淋巴道转移过程中起调控作用,但在乳腺癌方面的研究国内外报道很少. 目的：探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、环氧化酶-2(COX-2)在乳腺癌组织中的相互表达关系及其与淋巴管生成,淋巴结转移和预后的关系. 方法：应用免疫组化二步法检测70例乳腺癌组织COX-2与VEGF-C蛋白的表达,并用淋巴管内皮细胞特异性抗体D2-40标记淋巴管,计数肿瘤淋巴管密度(D2-40positive Iymph vessel density,LVD),结合临床病理资料和随访资料进行分析. 应用SPSSl3.0统计软件包分析,采用t检验,X<2>检验,相关分析用Spearman等级相关分析,生存分析单因素分析采用Kaplan-Meier曲线法和Log-rank检验;多因素分析采用Cox回归模型.P<0.05为差异有统计学意义. 结果：1.VEGF-C阳性表达物质呈棕黄色颗粒状,弥漫性或局灶性分布于细胞胞浆内.COX-2阳性表达也主要定位于癌细胞胞浆内,呈棕黄色.乳腺癌组织中VEGF-C和COX-2蛋白的高表达率分别为42.8﹪(30/70)和65.7﹪(46/70).D2-40阳性表达定位在淋巴管内皮细胞,乳腺癌组织中绝大多数淋巴管位于肿瘤间质组织内,管壁薄,管腔大小不一,形态不规则.部分淋巴管内可见癌细胞浸润(D2-40positive lymph vessel invasion.LVI).2.随着癌组织分化程度的升高,VEGF-C蛋白的表达明显降低,呈显著负相关(P<0.001).VEGF-C蛋白的表达与淋巴结转移、LVD和LVI呈正相关(P>0.05).COX-2蛋白的表达也与淋巴结转移(P=0.012)、LVD(P=0.038)和LVl(P=0.016)有关,并且COX-2蛋白的表达与雌激素受体状态相关(P=-0.037).3.乳腺癌LVD与有无区域淋巴结转移(P<0.001)、LVI(P=0.001)呈正相关,而和年龄、组织学分级、肿瘤大小、组织学类型、激素受体状态及Her-2表达无关(P>0.05).4.乳腺癌组织COX-2蛋白(-,+,2+,3+)与VEGF-C蛋白表达(-,+,2+,3+)之间存在显著的相关性(r=0.529,P<0.001).5.经Kaplan-Meier生存曲线分析,VEGF-C和COX-2蛋白的高表达都与无病生存率(P=0.008,P=0.009)及总生存率(P=0.014,P=0.043)呈负相关.LVD也与无病生存率(P=0.011)及总生存率(P=0.001)呈负相关.用Cox比例风险模型对各临床病理指标进行多因素分析,雌激素受体状态(P=0.045)、LVI(P=0.025)、LVD(P=0.015)和Her-2表达(P=0.007)是无病生存率的独立风险预测因子,而只有LVD(P=0.002)和Her-2表达(P=0.028)是总生存率的独立风险预测因子. 结论：1.D2-40能特异性地免疫染色微淋巴管,是研究肿瘤淋巴管生成的特异性标记物.在乳腺癌组织中D2-40标记的新生淋巴管主要分布于肿瘤间质.乳腺癌中LVD与淋巴结转移密切相关,并且是患者的独立预后指标.提示乳腺癌的淋巴管密度测定对评估其淋巴结转移和预后判断可能具有重要意义,通过靶向抑制肿瘤淋巴管生成将有望成为治疗乳腺癌的新策略. 2.COX-2蛋白与VEGF-C蛋白的表达与乳腺癌淋巴结转移,淋巴管生成密切相关,对COX-2和VEGF-C表达的检测可用来作为判断乳腺癌的淋巴结转移、评估预后的参考指标. 3.COX-2蛋白与VEGF-C蛋白表达之间存在显著的相关性,提示在乳腺癌中COX-2可能通过上调VEGF-C的表达,并次第促进淋巴管生成和淋巴结转移.