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背景和目的肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。据2000年资料统计,全球约有1 100 000例患者因此病而死亡。并且其发病人数呈逐年递增的趋势。然而由于其早期症状不明显,又缺乏敏感的筛查指标及有效的早期诊断方法,致使大多数肺癌患者确诊时已到了疾病的晚期,错过了接受最佳治疗的时机,只能进行姑息性治疗。因此其5年生存率也只有15%左右,成为人类因肿瘤所致死亡率最高的疾病。microRNA (miRNA)指长度约21-25nt、非编码、单链小型的RNA,能够识别特定的靶(?)nRNA,在转录后水平通过促进靶mRNA的降解和/或抑制其翻译过程而发挥负调控基因表达的作用,涉及细胞的分化、增殖、代谢、耐药及死亡等多种生物进程。并且不同的miRNA具有抑癌基因或癌基因的功能,其异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关。研究表明,miR-31在肺癌的发生、发展中具有重要的作用。因此,对miR-31在肺癌组织、血清及细胞中的表达进行检测,了解其表达特征以及与肺癌的诊断、肿块大小、淋巴结转移、吸烟及分期的关系,这不仅有助于进一步了解肺癌的发生、发展机制,并能对肺癌的早期筛查、早期诊断提供指导。材料与方法1材料来源64对肺癌组织及癌旁正常组织标本、74例手术患者血清标本、73例Ⅳ期肺癌患者血清标本均取自河南省肿瘤医院2008.12～2010.9进行手术或化疗的肺癌患者。114例正常对照血清标本取自2010.4-2010.9在河南省肿瘤医院、河南省人民医院、河南大学附属淮河医院进行体检的正常人群。人高转移肺癌细胞株95D由中国医学科学院肿瘤研究国家分子肿瘤学重点开放实验室建立,人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549及耐药细胞株A549由郑州大学基础医学院临床药理研究所惠赠。按照WHO标准(2004版)进行组织学分类及UICC(2009年第7版)标准进行TNM分期。2实验方法采用Trizol法提取组织、血清、细胞中的总RNA,并对miRNA进行Poly A加尾、反转录。采用荧光real-time PCR方法对miR-31的表达进行检测。3统计学方法采用SPSS 17.0软件进行相关数据统计学处理。所有数据比较采用非参数检验。检验水准a=0.05。结果1 miR-31在组织中的表达情况miR-31在64例肺癌患者癌组织中的表达量均高于癌旁正常组织,为癌旁正常组织的5.89倍,P<0.001；在Ⅰ期、Ⅱ期早期患者中,miR-31在癌组织中的表达量也高于正常组织,P值分别为0.002、0.005；在肿块长径>3cm组的表达量为肿块长径≤3cm组的3.17倍,P=0.045。无论淋巴结转移与否,miR-31的表达量没有明显差异,P=0.703。在Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期中的表达存在差异,但无统计学意义,P=0.413。2 miR-31在血清中的表达情况在Ⅰ-Ⅳ期的肺癌患者血清中,miR-31的表达量为正常对照的7.66倍,P<0.001；在Ⅰ期、Ⅱ期早期患者中,miR-31在肺癌患者血清中的表达量也高于正常对照血清,P值分别为0.03、<0.001。在手术肺癌患者血液中,肿块长径>3cm组患者血液中miR-31的表达量明显高于肿块长径≤3cm组,P=0.027；淋巴结转移阳性组与阴性组之间相比,P=-0.245。并且与有无远处转移无关,P=0.268。3 miR-31在细胞中的表达情况在人高转移肺癌细胞株95D、人非小细胞肺癌细胞株A549及耐药A549细胞中,miR-31的相对表达量分别为0.043、0.072、0.131。4 miR-31的表达与吸烟的关系在组织标本中,45例吸烟患者与19例非吸烟患者相比,吸烟患者组织中miR-31的表达量为非吸烟患者的3.06倍,P=0.033。5 miR-31的表达与手术的关系在74例行手术治疗的患者中,术后miR-31在血清中的表达量为术前的1.45倍,P=0.772。在腺癌、鳞癌、小细胞癌中,术前与术后相比无明显差异,P值分别为0.18、0.488、0.776。结论1血清中miR-31可能作为肺癌的生物标志物,在早期筛查及早期诊断方面具有一定的价值。2 miR-31可能参与肺癌的发生、发展,并可能与肺癌肿块的大小相关。3 miR-31可能不促进肺癌的转移。4 miR-31可能作为一个中介分子参与由吸烟而致肺癌发生、发展的过程。