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目的：应用短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)干扰多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226的NOTCH1基因表达，研究NOTCH1基因干扰对RPMI8226细胞周期、凋亡、IL-6分泌能力以及对抑癌基因蛋白的影响，探寻多发性骨髓瘤基因治疗的新靶点。方法：（1）针对人NOTCH1的基因序列设计合成四对含有短发夹结构的寡核苷酸序列，将其连入pGPU6/GFP/Neo质粒中，构建NOTCH1shRNA真核表达载体，经LipofectamineTM2000脂质体转染RPMI8226细胞，RT-PCR的方法筛选出最佳干扰的表达载体。（2）应用四唑盐（MTT）法绘制细胞生长曲线，观察NOTCH1shRNA对RPMI8226细胞增殖的影响；流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡；Western blot检测NOTCH1shRNA作用后notch1蛋白及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p27、p21表达水平的变化。（3）应用固相酶联免疫吸附（ELISA）法检测NOTCH1shRNA对RPMI8226细胞分泌IL-6的影响；结果：（1）NOTCH1shRNA转染72小时后，转染效率达60%±2.34%，采用RT-PCR法筛选出最佳的shRNA为NOTCH1-6260，其序列为Sense5’-CACCGGGACATCACGGATCATATGGTTCAAGAGACCATATGATCCGTGATGTCCCTTTTTTG-3’，Anti-sense5’-GATCCAAAAAAGGGACATCACGGATCATATGGTCTCTTGAACCATATGATCCGTGATGTCCC-3’。（2）NOTCH1shRNA转染组，阴性对照组（Neg-shRNA）及空白对照组生长增殖率分别为(49.09±2.31)%、(91.73±2.67)%、(98.10±0.41)%，转染组增殖率明显低于Neg-shRNA组和空白组（p<0.05）。NOTCH1shRNA转染组、Neg-shRNA对照组、空白对照组的G0/G1期细胞分别为(66.23±3.71)%、(42.27±3.65)%、(40.70±0.92)%，转染组明显高于其他两个对照组（p<0.05）；S期细胞分别为(31.03±1.49)%、(56.53±1.76)%、(51.83±1.45)%，转染组明显低于其他两个对照组（p<0.05）。比较Neg-shRNA对照组和空白组，NOTCH1shRNA转染组的notch-1蛋白表达下调(比空白组下降44.54%)，抑癌基因蛋白p27表达上调1.75倍、p21表达上调1.96倍。NOTCH1shRNA转染组、Neg-shRNA对照组、空白对照组的凋亡率分别为(46.67±1.31)%、(1.37±0.63)%、(0.85±0.43)%，转染组明显高于Neg-shRNA组和空白组（p<0.05）。（3）NOTCH1shRNA组分泌IL-6的OD值(28.18±3.50)，较Neg-shRNA组(167.08±7.97)和空白组(185.86±5.61)明显减低（p<0.05）。结论：（1）应用RNAi技术，NOTCH1-6260可有效地干扰RPMI8226细胞NOTCH1基因的表达。（2）NOTCH1shRNA可抑制细胞增殖，阻滞RPMI8226细胞于G0/G1期，上调p21、p27分子的表达可能是其机制之一。（３）NOTCH1shRNA可诱导细胞凋亡。（４）NOTCH1shRNA可下调与疾病相关的IL-6分泌能力。RNAi技术有望成为多发性骨髓瘤靶向基因治疗的新工具，NOTCH1基因可能成为多发性骨髓瘤靶向基因治疗的新靶点。