背景与目的肿瘤细胞黏附能力的改变,是肿瘤细胞的一个特征,可以影响到肿瘤细胞的脱落、种植转移和侵袭。近年来,腹腔镜手术广泛在临床开展,并已拓展到妇科恶性肿瘤治疗领域。自从有报道肿瘤腹腔镜手术后出现穿刺点转移（Portsite metastasis,PSM）的情况以来,对腹腔镜手术在妇科肿瘤细胞的扩散和转移方面的影响也逐渐开始受到关注。由此我们将子宫内膜癌细胞直接暴露于纯CO₂环境,对该环境下体外培养的子宫内膜癌细胞以及气腹条件下肿瘤细胞裸鼠体内移植后细胞黏附能力的改变进行实验研究,以探讨CO₂环境对子宫内膜癌细胞的黏附作用的影响及其机制。研究方法首先研究CO₂气腹环境对体外培养的子宫内膜癌细胞侵袭黏附能力的影响。取处于对数期生长的癌细胞,经消化、计数后调整为所需要的浓度,转入培养瓶中。细胞按在人工CO₂环境中培养时间分为4组:（1）对照组,培养瓶直接放入37℃,5%CO₂孵育箱中孵育。（2）2小时组,培养瓶中通入12mmHg、100%CO₂气体,37℃培养,2h后排气。（3）4小时组,培养瓶中通入12mmHg、100%CO₂气体,37℃培养,4h后排气。（4）6小时组,培养瓶中通入12mmHg、100%CO₂气体,37℃培养,6h后排气。分别于第1-9天每天取各组细胞用MTT法测定各组的吸光值,绘制细胞生长曲线。采用免疫荧光法检测各组细胞中β₁-整合素与E-钙粘素的定位以及表达情况。同时利用细胞基质黏附试验测定各组细胞的黏附力。其次研究CO₂气腹环境对子宫内膜癌裸鼠移植瘤侵袭黏附的影响。取30只裸鼠分为3组,1%异戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉后进行处理。（1）开腹组（10只）,进腹后将小肠外置腹腔5分钟放回腹腔并缝合,右下腹腔注射肿瘤细胞。40分钟后排除气体。（2）40分钟气腹组（10只）,经腹腔内灌注CO₂气体形成4mmHg的腹腔压力建立人工气腹5分钟后,右下腹腔注射肿瘤细胞。40分钟后排出气体。（3）80分钟气腹组（10只）,经腹腔内灌注CO₂气体形成4mmHg的腹腔压力建立人工气腹5分钟后,右下腹腔注射肿瘤细胞。80分钟后排出气体。记录每只裸鼠成瘤时间,四周后,取出移植瘤,一部分进行石蜡切片,HE染色观察移植瘤组织形态,一部分进行冰冻切片,用免疫荧光法检测各组肿瘤标本中的β₁-整合素与E-钙粘素的表达,进行定量分析。结果在体外培养的子宫内膜癌细胞中,通过细胞生长曲线的测定,可以看到试验三组的光密度在开始的1-4天大多显著低于对照组,随时间延长,吸光值有减小的趋势。自第五天开始,试验三组的细胞吸光值高于对照组,（P＜0.05,除了第五、第六天,2h组和对照组之间）,并随CO₂处理时间延长,吸光值有增大的趋势,但无统计学意义。β₁-整合素与E-钙粘素在子宫内膜癌细胞株的表达（间接免疫荧光染色）检测中可以看β₁-整合素阳性细胞为绿色荧光,表达定位主要在胞膜与胞浆。试验三组的平均吸光度值均明显低于对照组（P＜0.01）,试验三组之间只有2h组与6h组之间有差异,但平均值有随气腹时间延长,β₁-整合素表达降低的趋势。E-钙粘素在子宫内膜癌细胞的表达也在胞膜与胞质,阳性细胞为绿色荧光。试验三组的平均吸光度值均显著小于对照组,对照三组之间,2h组与6h组、4h与6h组之间有差异,表现出时问依赖的表达减少。细胞基质黏附试验中可以看到在60min时,试验三组的黏附率均显著高于对照组,（P＜0.01）,而试验三组之间除了2h组与4h组之间有差异外均没有差异性,（P＞0.05）。在120min时,试验三组的黏附率均高于对照组,（P＜0.05）试验三组之间均无差异（P＞0.05）,但是表现出随气腹时间延长黏附力增加的趋势。在裸鼠移植瘤的研究中,发现两个气腹组成瘤时间比开腹组短（P＜0.05）,HE染色中气腹组肿瘤组织中血管多。β₁-整合素在子宫内膜癌裸鼠移植瘤组织的表达,气腹二组的平均光密度值均显著小于开腹组（P＜0.01）,80分钟组表达低于40分钟组（P＜0.05）。β₁-整合素在子宫内膜癌裸鼠移植瘤组织的表达表现出随气腹时间延长的表达降低。E-钙粘素在子宫内膜癌裸鼠移植瘤组织的表达与β₁-整合素的相似,开腹组的平均光密度高于气腹组（P＜0.01）,40分钟组与80分钟组之间无显著差异（P＞0.05）。结论通过对直接暴露于CO₂环境下体外培养的子宫内膜癌细胞以及气腹条件下肿瘤细胞裸鼠体内移植后细胞黏附能力的改变的实验研究,我们认为直接暴露于CO₂环境能增加子宫内膜癌细胞的转移黏附能力和增加肿瘤的侵袭黏附能力,其机制可能与CO₂气腹环境能影响肿瘤细胞表面黏附分子β₁-整合素和E-钙粘素等的表达有关。