【摘 要】
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目的:通过观察针刺对急性脑缺血再灌注大鼠模型神经行为学、脑梗死体积、脑组织病理学变化、HIF-1α、NLRP3炎症小体及相关炎症指标（白介素1βIL-1β、肿瘤坏死因子αTNF-α）mRNA和蛋白表达的影响,探讨针刺调控HIF-1α/NLRP3炎症信号减轻脑缺血再灌注损伤的效应及作用机制。方法:研究采用改良的Longa线栓法建立急性脑缺血大鼠模型,于缺血2h后再灌注,建立脑缺血再灌注大鼠模型。干预
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目的:通过观察针刺对急性脑缺血再灌注大鼠模型神经行为学、脑梗死体积、脑组织病理学变化、HIF-1α、NLRP3炎症小体及相关炎症指标（白介素1βIL-1β、肿瘤坏死因子αTNF-α）mRNA和蛋白表达的影响,探讨针刺调控HIF-1α/NLRP3炎症信号减轻脑缺血再灌注损伤的效应及作用机制。方法:研究采用改良的Longa线栓法建立急性脑缺血大鼠模型,于缺血2h后再灌注,建立脑缺血再灌注大鼠模型。干预方式选用“醒脑开窍”针刺法。根据随机数字表法,将雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、“醒脑开窍”针刺治疗组（以下简称针刺组）和非穴位针刺组（以下简称非穴组）。观察针刺对各组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织病理学的影响,明确针刺减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的效应。继而采用Real-time PCR检测大鼠脑梗死皮层组织中HIF-1α、NLRP3的mRNA表达变化,并使用Western blot法检测大鼠脑梗死皮层组织中HIF-1α、NLRP3及炎症相关指标（IL-1β、TNF-α）蛋白表达情况,明确“醒脑开窍”针刺法减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制。结果:1.假手术组无行为学改变及梗死灶出现;与假手术组比较,模型组神经行为学评分及脑梗死体积百分比升高（P＜0.01）;与模型组比较,针刺组神经行为学评分及脑梗死体积百分比减少（P＜0.01）,非穴组神经行为学评分及脑梗死体积百分比变化无统计学差异（P＞0.05）;与非穴组相比,针刺组神经行为学评分及脑梗死体积百分比低于非穴组（P＜0.01）。2.HE染色可见,假手术组脑组织形态结构无明显变化;模型组大鼠脑组织出现大量神经细胞死亡等病理损伤;与模型组比较,针刺组脑组织病理损伤状况较之减少,非穴组脑组织病理损伤程度与模型组相仿;针刺组与非穴组对比可见针刺组的神经细胞损伤情况减轻。3.与假手术组比较,模型组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3的mRNA表达升高（P＜0.05）;与模型组相比,针刺组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3的mRNA表达明显降低（P＜0.05）,非穴组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3的mRNA表达无统计学差异（P＞0.05）;与非穴组比,针刺组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3 mRNA的表达下降（P＜0.05）。4.与假手术组比较,模型组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3、IL-1β、TNF-α的蛋白表达升高（P＜0.05）;与模型组相比,针刺组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3、IL-1β、TNF-α的蛋白表达下降（P＜0.05）,非穴组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3、IL-1β、TNF-α的蛋白表达无统计学差异（P＞0.05）;与非穴组比,针刺组梗死侧大脑皮层HIF-1α、NLRP3、IL-1β、TNF-α蛋白的表达下降（P＜0.05）。结论:1.早期针刺介入,能够有效降低神经行为学评分,减少脑梗死体积,减轻脑组织损伤,改善大鼠神经功能缺损,具有减轻脑缺血再灌注损伤的效应。2.针刺能够下调HIF-1α、NLRP3 mRNA和蛋白的表达及相关炎症因子IL-1β、TNF-α的蛋白表达,提示针刺通过抑制HIF-1α/NLRP3炎症信号,可减少脑梗死再灌注后炎症反应的发生,从而减轻再灌注损伤。
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