白芍、赤芍化学成分及其质量评价研究

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目的:1、采用柱分离技术、制备TLC等多种色谱分离方法,对白芍和赤芍进行化学成分研究;2、应用高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用技术对芍药药材的化学成分进行质谱分析,归纳和总结芍药各类成分的质谱裂解规律;3、评价其护肝药理活性,考察白芍、赤芍药材护肝药效的差异及其与化学成分异同的相关性。  方法:1、采用乙醇浸渍提取,D101大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、ODS、制备TLC等多种色谱分离方法,对白芍和赤芍进行化学成分研究;2、应用高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱联用技术对芍药药材的50%甲醇提取物进行分析,并对各色谱峰进行了化学归属,较系统地研究了芍药各类成分的质谱裂解规律;3、选择合适的指标,并对白芍、赤芍化学成分的护肝药效进行评价。4、考察白芍、赤芍药材护肝药效的差异及其与化学成分异同的相关性。  结果:1、白芍和赤芍的混合提取物经过大孔吸附树脂D101柱,采用30%、70%EtOH洗脱后得到的浸膏,再经过硅胶柱,用氯仿-甲醇梯度(100,100:5,100:10,100:20,4:1)洗脱,反复柱层析后得到13个单体化合物,分别为:芍药苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酰氧化芍药苷、丹皮酚、苯甲酸、没食子酸、对羟基苯甲酸、齐墩果酸、槲皮素、儿茶素、山柰酚、β-谷甾醇和胡萝卜苷;2、采用液相色谱-飞行时间串联质谱分析白芍、赤芍中化学成分,根据确证其结构的已知对照品、化合物的二级质谱所得的子离子信息,结合紫外光谱、HPLC保留时间以及参考文献共指认了30多个化学成分的可能结构,并对不同结构类型和结构特征化合物的质谱裂解规律进行了归纳和总结;3、考察白芍、赤芍的护肝药理活性差异,初步通过液相色谱指纹图谱的比较分析来辨别该药材的品种和来源,判定其质量。  结论:白芍、赤芍在中医药学、生物学、化学上既有相似性又有明显差异。这二味药材已发现的主要活性成分包括单萜苷、酚酸及其苷类、黄酮及其苷类、胡萝卜苷、蔗糖等,其中最重要的成分为单萜苷。现代药理研究发现单萜苷类成分可以产生一系列药理活性,然而这些单萜苷具体的活性机制却并不明确。而二种中药所含单萜苷含量的差异,极有可能是导致其药理活性不同的根源。需要进一步进行研究。本研究突破以往鉴别和评价中药质量的模式,在保持中医药特色的基础上,引入新的检测理念和手段,通过综合多种色谱和色谱质谱联用技术,结合化学成分分离手段,进行上述两种常用中药材系统的质量评价,在二味药材活性成分的差异比较方面,较前人有了更深入的认识,在质量评价方面,于各项测定指标方面均有明显的改进和提高。
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