人鼻病毒(Human rhinovirus,HRV)是人呼吸道感染主要病原之一,属于小RNA病毒科肠道病毒属,分为A、B和C属,包括80个HRV-A、32个HRV-B和57个HRV-C组,共169个基因型。目前我国HRV的基因型分布特征尚不清楚,其在临床重症呼吸道感染中的病原学作用尚有争议。本研究阐释HRV在我国近年流行的基因型特征,分离了病毒株,为阐明HRV的基因型分布特征和为揭示其在重症肺炎中的病原学作用提供依据。本研究呼吸道样本来自2014-2018年入组的急性呼吸道感染病例,通过核酸检测鉴定HRV阳性,共986例,通过扩增病毒核衣壳蛋白基因VP1、VP4/VP2对病毒进行分型,404例HRV病例中获得可分型的序列,通过对上述基因的进化分析,结果表明有104种基因型,其种A种59个基因型,占已知基因型73.7%,B种18个,占已知基因型56.2%,C种27个,占C种已知基因型47.3%。按照临床上呼吸道感染和肺炎诊断,基于Spearman相关分析表明,性别(P=0.025),年龄(P<0.01),以及HRV种(P<0.01)与肺炎诊断显著相关,重症肺炎中男性最高(177/293,60.4%)(χ2=4.5,P<0.05),45-65 岁最高(103/293,35.1%)(χ2=32.1,P<0.01),HRV-B(44/44,100%)高于 HRV-A(179/279,64.2%)和 HRV-C(70/81,86.6%)(χ2=34.3,P<0.01)。A51(χ2=5.1,P=0.02)、C11(χ2=4.3,P=0.03)与重症呼吸道感染显著相关(P<0.05)。HRV阳性的404例样本中有166例病原共检出,肺炎克雷伯杆菌的共检出频次最高(20/166,12%),其次为肺炎支原体(15/166,9%)和肺炎链球菌(14/166,8.4%)。HRV-A有24.1%(65/279)病例有共检出,B种59%(26/44)病例共检出,C种30.8%(25/81)的病例有共检出。A种、B种和C种的共检出率无显著差异(P=0.19)。为进一步阐释HRV病原学作用,我们选择了 HRV阳性的下呼吸道感染病例呼吸道样本,接种H1-HeLa细胞分离HRV毒株,共获得21株分离株。序列分析显示21株分离株分属于15个基因型,分别为A01、A10、A16、A24、A30、A45、A60、A73、A89、A94、A98、B27、B42、B52和B86。中和试验分析表明,在21个分离株中3株在原始HRV 阳性病例恢复期血清中产生中和抗体且效价有4倍增高,提示HRV感染在重症肺炎发生中的重要病原学作用;虽然从样本中分离了毒株,但18个毒株在其来源的阳性病例恢复期血清中未见产生效价增高4倍的抗体,提示HRV在临床感染中的复杂病原学意义。综上所述,本研究深入阐释我国HRV流行的基因型特点,获得HRV毒株将为进一步阐释病毒在重症呼吸道感染的病原学作用研究提供可用资源。