生物活性肽在凝胶敷料中的应用研究

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皮肤损伤问题严重影响着人们的健康生活,如紫外线造成的的皮肤损伤。但目前市售的皮肤损伤修复产品大多含有激素,具有安全隐患。因此,迫切需要开发一种安全无刺激并且具有修复功效的新产品。本课题以安全无毒副作用的生物活性肽作为功效成分来制备生物活性肽凝胶敷料,研究了其配方及工艺,对其进行了质量评价,并且进行了功效测定和作用机制的初步探索。首先,进行生物活性肽凝胶敷料配方设计。在单因素实验基础上,以感官评分,透明度,稳定性为指标进行D-最优混料设计实验,将三个指标同步优化,得到最佳配方。再对其防腐体系进行设计,通过抑菌圈实验对单一防腐剂进行初筛,将筛选出的三种防腐剂复配进行防腐挑战试验,得到防腐体系最佳配方。由此,可以确定生物活性肽凝胶敷料的最终配方为生物活性肽0.01%,椰子油0.25%,棕榈酸异丙酯0.5%,肉豆蔻酸异丙酯0.75%,吐温80 1.55%,甘油8%,丙二醇2%,卡波姆0.24%,三乙醇胺0.16%,双咪唑烷基脲0.15%,对羟基苯甲酸甲酯0.2%,1,2-己二醇1.0%。其次,对生物活性肽凝胶敷料的制备工艺进行优化。在单因素实验基础上,以粘度和粒度为指标建立综合评分机制,以综合评分为响应值进行响应面优化实验,得到的最佳制备工艺为均质时间10.57 min,均质转速997.81 r/min,温度67.03℃。再对制得的生物活性肽凝胶敷料进行耐热、高低温循环、离心、强光照、加速和长期实验的稳定性评价,并检测其微生物指标,结果表明其具有良好的稳定性且微生物指标符合规定。然后,进行生物活性肽凝胶敷料的修复功效测定。体外实验方面通过MTT法以成纤维细胞增殖率为指标进行功效测定;体内实验方面建立小鼠皮肤损伤模型,从宏观变化和病理学方面来考察生物活性肽凝胶敷料的修复功效。体内和体外实验结果表明,生物活性肽凝胶敷料具有修复的功效。最后,进行生物活性肽凝胶敷料修复机理的初步探究。通过分析紫外线损伤小鼠皮肤组织内抗氧化酶的活力,脂质过氧化产物和相关炎症因子的含量进行修复机理的初步探索。结果表明该生物活性肽凝胶敷料可以显著提高抗氧化酶(SOD、CAT)的活力,降低脂质过氧化产物MDA含量;降低相关炎症因子(IL-1β、IL-6)的过度表达,从而在抗氧化和抗炎途径共同修复皮肤损伤。综上所述,本实验实现了生物活性肽在凝胶敷料中的应用,完成了生物活性肽凝胶敷料的配方设计,工艺优化,质量评价,功效测定和作用机理的初步探索。
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