[研究背景与目的]肿瘤的恶性程度取决于肿瘤细胞的生长效率,而充足的能量供应是肿瘤细胞恶性增殖的前提和必要条件。“Warburg效应”是指在氧气足以支持线粒体氧化磷酸化的情况下,肿瘤细胞仍采用糖酵解的方式进行代谢。这种代谢异常现象,也被列为新的肿瘤十大特征之一。与正常细胞相比,肿瘤细胞的这种低效率代谢方式消耗了大量的葡萄糖,分泌乳酸形成免疫抑制微环境,同时能够快速合成增殖所需的中间产物,因此靶向肿瘤糖酵解代谢环节是目前抗肿瘤治疗的重点策略。而肿瘤在中医认知中是一种气滞不畅、血瘀不行的肿块,类似于增生组织,应施以消癥散结的活血化瘀药。隐丹参酮是一种从活血化瘀类中药丹参中提取的脂溶性二萜醌类化合物,其抗肿瘤活性已在多种恶性肿瘤中被证实,但目前的研究多集中在其对细胞周期和凋亡的影响,那么隐丹参酮能否在肿瘤中发挥改变代谢的作用,促进肿瘤细胞代谢正常化、改善肿瘤微环境,从而抑制肿瘤生长?其内在调控机制又是如何?本研究基于隐丹参酮对黑色素瘤代谢活动的影响,探究其对肿瘤生长的影响并剖析其具体作用机制。[研究内容与结果]（1）通过MTT、EdU增殖实验、细胞周期与凋亡检测实验考查隐丹参酮对黑色素瘤细胞生长的影响。结果表明隐丹参酮在体外能够显著降低B16F10、A375细胞的细胞活力,抑制细胞增殖,诱导细胞周期停滞在G2/M期,最终导致细胞凋亡。（2）采用非靶向代谢组学分析隐丹参酮处理后的B16F10细胞,发现细胞内源性代谢产物存在明显的差异,差异产物的通路富集分析主要集中在三羧酸循环、糖酵解/糖异生等糖代谢;海马细胞能量代谢检测仪、糖酵解相关试剂盒检测结果表明隐丹参酮能够在体外抑制B16F10、A375细胞的胞外酸化率、葡萄糖摄取、丙酮酸、乳酸生成,即抑制了糖酵解过程。（3）对糖酵解关键激酶活性检测结果表明,隐丹参酮显著抑制了磷酸果糖激酶的活性,Western Blot、免疫荧光等实验结果表明隐丹参酮增加了 AMPK的磷酸化水平,并抑制了HIF-1α、PFKFB3、LDHA、MCT4等糖酵解相关蛋白水平,而加入AMPK抑制剂Compound C后减弱了隐丹参酮对B16F10细胞生长和糖酵解的抑制作用。（4）构建B16F10、A375细胞的皮下移植瘤模型进一步验证隐丹参酮在体内对黑色素瘤的抑制作用。结果与体外实验结果一致,隐丹参酮给药组的肿瘤生长速度减缓,瘤组织内Ki67 阳性细胞减少、TUNEL 阳性细胞增多,免疫组化结果显示隐丹参酮能够显著抑制瘤组织内Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达,促进肿瘤细胞的凋亡;糖酵解相关试剂盒检测结果显示,隐丹参酮抑制了瘤组织内糖酵解代谢产物的生成及磷酸果糖激酶的活性。[结论与意义]本课题基于“Warburg效应”理论,以活血化瘀类中药丹参中的主要成分隐丹参酮为研究对象,开展隐丹参酮作用代谢重编程影响黑色素瘤生长的研究。实验结果表明隐丹参酮能够激活AMPK,抑制HIF-1α,阻断了肿瘤细胞糖酵解过程,进而诱导黑色素瘤细胞的细胞周期停滞,抑制细胞增殖,最终导致黑色素瘤细胞凋亡。本课题将活血化瘀药成分起效方式与能量代谢联系起来,从全新的角度寻找解释活血化瘀类中药成分抗肿瘤的作用机制,为临床上活血化瘀药在肿瘤治疗中的应用提供理论依据。