【摘 要】
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目的:探讨光敏剂芦荟大黄素光动力治疗骨肉瘤MG63的可能性及其可能机制。方法:芦荟大黄素光动力作用于骨肉瘤细胞株MG63,采用MTT法检测不同浓度芦荟大黄素,不同剂量LED光照能量治
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目的:探讨光敏剂芦荟大黄素光动力治疗骨肉瘤MG63的可能性及其可能机制。方法:芦荟大黄素光动力作用于骨肉瘤细胞株MG63,采用MTT法检测不同浓度芦荟大黄素,不同剂量LED光照能量治疗后细胞增殖状态; Hoechst细胞核染色观察细胞的凋亡情况,流式细胞技术测定细胞凋亡率;Mito-Tracker染色观察AE在细胞内的亚细胞定位情况,染色观察细胞内ROS变化情况,罗丹明123染色检测线粒体膜电位变化;Western Blot检测caspase-9,-12,-3,Bcl-2,Bax,cytochrome c,Grp-78,CHOP,JNK蛋白表达变化。结果:实验表明芦荟大黄素光动力疗法显著抑制骨肉瘤细胞株MG63细胞的生长,且其抑制作用呈一定的剂量效应关系;芦荟大黄素光动力作用MG63细胞发生凋亡和继发性坏死的比率均显著高于单纯光照射组、单纯光敏剂芦荟大黄素处理组和空白对照组(P<0.05),而后三组间无明显差异(P>0.05)。芦荟大黄素的亚细胞定位主要集聚在线粒体,PDT处理后产生大量ROS,其中以处理后1h-2h为高峰期;通过检测后续的凋亡通路,我们发现线粒体凋亡通路和内质网通路相关因子水平发生改变,包括:细胞线粒体膜电位下降;Western Blot检测发现cytochrome c表达下降,caspase-9和caspase-3蛋白表达升高;caspase-12,Grp-78和CHOP蛋白表达上调;Bcl-2蛋白表达略有降低。结论:芦荟大黄素介导的光动力疗法能有效抑制骨肉瘤细胞株MG63细胞生长并诱导其发生凋亡和/或死亡,且线粒体凋亡通路及内质网凋亡通路可能参与了这一过程。
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