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目的利用原位细胞死亡检测法检测颗粒细胞凋亡情况,研究四物合剂对腹腔注射化疗药物顺铂后的大鼠血激素、卵巢颗粒细胞层厚度及凋亡指数的影响,探讨四物合剂对化疗所致卵巢储备功能下降的大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。材料和方法1.动物分组与模型制备：雌性SD大鼠,清洁级,体重(190±10)g,分为正常组、顺铂组、四物组和倍美力组。除正常组外其他三组均腹腔注射顺铂后,顺铂组灌胃纯净水；四物组灌胃四物合剂；倍美力灌胃倍美力溶液。2.四物合剂对化疗后大鼠血激素水平的影响：自实验第1日起,各组大鼠每日取阴道分泌物,制作阴道涂片以观察其动情周期的变化。灌胃给药7d后,于第8日晨,麻醉后取血清,采用化学发光法测定雌二醇(E：)、卵泡刺激素(FSH)、孕酮(Pro)和黄体生成激素(LH)。3.四物合剂对化疗后大鼠卵巢颗粒细胞层厚度的影响：灌胃7d后,于第8日晨,麻醉后,取双侧卵巢,放入10%中性甲醛固定,脱水,包埋,切片,HE染色,图像分析仪下显微测量颗粒细胞层最大厚度。4.四物合剂对化疗后大鼠卵巢颗粒细胞凋亡指数的影响：卵巢切片常规脱蜡至水,TUNEL法检测颗粒细胞凋亡,具体操作按说明书。苏木精复染,流水冲洗返蓝,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。图像分析仪下计算颗粒细胞细胞凋亡指数。结果1.四组大鼠血中FSH值差异有统计学意义,模型组FSH值升高明显且与正常组之间有统计学意义,卵泡对FSH敏感性降低是卵巢功能衰退的早期征象,此结果说明造模成功；各组LH值无统计学意义；Pro值模型组与正常组之间有统计学意义；E2值倍美力组与模型组之间有统计学意义。2.粒细胞层厚度值中模型组与正常组之间有统计学意义,倍美力组与模型组之间有统计学意义。凋亡指数值中模型组与正常组之间有统计学意义,四物合剂组和倍美力组与模型组之间均有统计学意义。结论1.四物合剂可提高化疗后大鼠血中雌激素的水平,四物合剂可改善化疗导致的低雌激素血症。有改善作用,这有利于化疗后大鼠卵巢功能的恢复。2.四物合剂可增加卵巢颗粒细胞层厚度,颗粒细胞参与多种性激素的分泌和调节,颗粒细胞层厚度的增加能有利于其更好的发挥作用,对卵巢功能的恢复有重要意义。3.四物合剂可降低卵巢颗粒细胞的凋亡指数,可降低顺铂引起的细胞的异常凋亡,表明四物合剂有可能是通过抑制颗粒细胞的异常凋亡而保护卵巢的正常功能。但四物合剂是因为其植物雌激素样作用而发挥的作用,还是通过抑制颗粒细胞的异常凋亡而发挥作用是值得探讨的。