本论文以我国有代表性的蜜源花粉为原料，使用气相色谱-质谱技术、超临 界CO2萃取技术等现代科技手段，以油脂领域通常采用的从脂质到脂肪酸再到 多不饱和脂肪酸的学术思路，对花粉中多不饱和脂肪酸(PUFAs)的相关内容进行 了较为全面的研究。 采用索氏提取法首次测定了哈蜜瓜花粉、五倍子花粉、茵陈花粉、猕猴桃花 粉、黄柏花粉、益母草花粉六种花粉的脂质含量。虞美人花粉的脂质测定在国内 也是第一次。 用气相-质谱技术测定了前人没有测定的哈蜜瓜花粉、五倍子花粉、茵陈花 粉、猕猴桃花粉、黄柏花粉、益母草花粉、山楂花粉七种花粉的脂肪酸。虞美人 花粉脂肪酸在国内亦属首次测定。第一次在玉米花粉中检出α-亚麻酸、在油菜花 粉和向日葵花粉中分别检出十六碳三烯酸。 对16种不同花粉PUFAs等指标分析表明，花粉的PUFAs含量居总脂肪酸 (TFAs)首位，饱和脂肪酸(SFAs)居次位，单不饱和脂肪酸(SUFAs)最少。PUFAs 的平均含量是45.74％。SFAs的平均含量是42.35％。SUFAs的平均含量是10.62 ％。在PUFAs中，α-亚麻酸(ALA)和亚油酸(LA)最丰富，平均含量分别为 28.00％和17.37％。而在SFAs中，十六烷酸的含量最高，平均含量为32.60％。 本实验发现花粉含有大量的ALA而未检测到γ-亚麻酸(GLA)，而ALA是人体 必需脂肪酸。在过去文献中，均没有区别检测ALA和GLA两种同分异构体。 因此本研究比前人提升了一步。 深入研究了不同破壁方法对花粉PUFAs等相关指标的影响。就脂质得率来 说，以纤维素酶水解破壁法的效果最好，冷冻破壁法和超声波破壁法相对较差。 通过正交实验得出酶解破壁法的最佳实验条件：加酶量为0.75％(酶/花粉)、 pH4.5、反应温度50℃、时间5h。在此条件下的酶解破壁法与索氏提取法比较， 前者大幅度增加PUFAs含量，由39.41％上升到78.48％。明显减少SFAs含量。 稍微减少SUFAs含量。到目前为止，尚未见有运用酶解破壁法研究花粉PUFAs 的报道。 首次探讨了超临界CO2萃取法(SFE-CO2)对提取花粉PUFAs等指标的影 响。就脂质得率来说，通过正交实验获得最佳实验条件为：萃取压力35 MPa、 萃取温度45℃、萃取时间1.5h、原料粒度20目～40目。在此SFE-CO2萃取条件 下，与索氏提取法相比较，PUFAs增幅不大；SUFAs增加较多；SFAs则减幅 较大。 通过SFE-CO2，首次在花粉中测出二十四碳烯酸(C24：1，又叫神经酸)，神 经酸在大脑发育和智力提高方面有重要意义。与索氏提取法比，SFE-CO2还新 增加了十六碳烯酸(C16：1，又叫棕榈油酸)和十六碳二烯酸(C16：2)。 采用尿素包合法对花粉PUFAs富集的最佳条件为：脲酯比3.0：1(质量比)、 温度20℃、溶剂为甲醇。在此条件下，一次脲包后，PUFAs含量由39.41％上升 为70.88％，SFAs和SUFAs的含量显著下降。二次脲包后，PUFAs含量再次上 升到84.61％，SFAs和SUFAs含量则继续下降。达到了富集浓缩PUFAs的目的。 尿素包合法对花粉PUFAs富集研究尚未见报道。 对同～油菜花粉品种中PUFAs等指标与不同气候条件之间关系的研究发 现，随着气温由高到低，油菜花粉的PUFAs、TUFAs(总不饱和脂肪酸)和IUFA (不饱和指数)则由低到高。花粉中的这一现象是首次发现。此实验还在油菜花 粉中第一次检测到十六碳烯酸和十六碳二烯酸。 油菜花粉PUFAs调节血脂的功能实验表明，在中剂量组(4 ml/kg)作用下， 与对照比较，TC、TG和LDL-C降幅分别为40.81％、31.21％和34.38％，HDL-C 增幅为13.51％。这说明油菜花粉PUFAs有确切的调节血脂功能。花粉PUFAs 对高血脂症大鼠的调节血脂研究以前未见文献记载。 鉴于重要的PUFAs有多方面功效，而花粉富含LA和ALA，且AA(花生 四烯酸)、EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)可由LA或ALA 代谢形成。因此全面深入研究花粉PUFAs具有重要意义。 关键词：花粉；多不饱和脂肪酸；纤维素酶；尿素包合法；超临界CO2萃取；高血脂症