蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite)由于基因资源的限制,缺乏蓝色系品种,运用分子手段,向蝴蝶兰导入外源基因使其获得新的花色素合成能力能够跨越该种植物基因库内基因类型的限制和由于种族隔离无法直接获得其他种植物蓝色形成基因的限制,为定向改良植物花色育种提供理论依据。本研究以蝴蝶兰‘大辣椒’为材料,将不同来源蓝色形成基因的植物表达载体构成不同组合瞬时转化蝴蝶兰,初步探索蓝色形成基因对蝴蝶兰花色的遗传调控并筛选出适合稳定转化的载体组合,构建植物稳定转化表达载体;同时研究了蝴蝶兰外植体取材、消毒方式、基本培养基、6-BA和NAA的配比及浓度对不定芽诱导、增殖、生根的影响,探索建立蝴蝶兰的再生繁殖体系,设置不同潮霉素浓度,筛选类原球茎最适选择压力。取得的结果如下:1.来自葡萄风信子的Ma DFR和Ma F3?5?H载体组合在瞬时转化蝴蝶兰后,花瓣颜色变深,进一步经花青苷含量测定结果显示转化后的花瓣花青苷含量是野生型的1.32倍,从而筛选出适合稳定转化的载体组合,即Ma DFR+Ma F3?5?H。2.构建了植物双元表达载体p CAMBIA1301-Ma DFR-Ma F3?5?H,用于后续稳定转化蝴蝶兰。3.(1)花梗适合作为不定芽诱导外植体,出芽率优于花苞、花葶和花萼;(2)先用2%过氧化氢溶液处理15min,再用10%次氯酸钠溶液处理10min,消毒效果良好,花梗污染率低,为26.6%;(3)花梗诱导最适培养基为:花宝1号+花宝2号+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L,出芽率为78.9%;(4)不定芽增殖最适培养基为:花宝1号+6-BA 5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,增殖系数为3.60;(5)幼苗生根最适培养基为:1/2MS+NAA 0.2 mg/L,生根率为73.7%。建立了蝴蝶兰‘大辣椒’的再生体系。