【摘 要】
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背景与目的:经皮冠状动脉介入治疗是救治冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的关键策略,但也会导致冠状动脉内皮细胞层的机械损伤。血管内皮损伤是支架内再狭窄的病理生理基础,受损内皮重新被内皮细胞覆盖的再内皮化是血管损伤修复的重要标志。内皮祖细胞可以迁移到血管内皮损伤处促进再内皮化,是减少经皮冠状动脉介入治疗相关并发症的重要靶点。但内皮祖细胞移植对血管损伤修复的作用及其机制尚未完全阐明,在本研究中,我们在
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81800221）；
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背景与目的:经皮冠状动脉介入治疗是救治冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）的关键策略,但也会导致冠状动脉内皮细胞层的机械损伤。血管内皮损伤是支架内再狭窄的病理生理基础,受损内皮重新被内皮细胞覆盖的再内皮化是血管损伤修复的重要标志。内皮祖细胞可以迁移到血管内皮损伤处促进再内皮化,是减少经皮冠状动脉介入治疗相关并发症的重要靶点。但内皮祖细胞移植对血管损伤修复的作用及其机制尚未完全阐明,在本研究中,我们在大鼠颈总动脉球囊拉伤后内皮祖细胞移植对损伤血管再内皮化的作用及其机制进行探究。方法:分离培养大鼠骨髓源内皮祖细胞并以细胞示踪剂标记,构建大鼠颈总动脉球囊拉伤模型,并在球囊拉伤后即刻移植标记后的内皮祖细胞。分别在球囊拉伤后第1天、第4天、第7天和第14天取材,通过病理切片染色分析损伤血管新生内膜增生面积、再内皮化程度以及炎症浸润程度（n=3）,通过激光片层照明荧光显微镜在三维层面上分析新生内膜增生体积、再内皮化程度和移植细胞的空间分布（n=3）。收集内皮祖细胞培养上清液,并在内皮祖细胞移植后采集大鼠血清,对内皮祖细胞的旁分泌功能进行分析（n=4）。结果:移植内皮祖细胞在球囊拉伤后第1天趋化性地富集黏附到损伤的血管管腔表面,假手术组未损伤的血管管腔表面则没有移植内皮祖细胞的黏附。球囊拉伤后第4天（0.175±0.434 a.u vs.0.095±0.041 a.u,P=0.023）、第7天（0.175±0.434 a.u vs.0.083±0.020 a.u,P=0.012）、第14天（0.175±0.434 a.u vs.0.073±0.030 a.u,P=0.007）,损伤血管管腔表面的移植内皮祖细胞较球囊拉伤后第1天明显减少。但与对照组相比,在球囊拉伤后第14天时,移植内皮祖细胞可以显著促进再内皮化（716±131 cells/mm~2 vs.156±10 cells/mm~2,P＜0.001）、遏止新生内膜增殖（0.066±0.018 mm~2 vs.0.137±0.008mm~2,P=0.040）、抑制炎症浸润（190±53 cells/mm~2 vs.479±150 cells/mm~2,P=0.004）。在三维层面上,球囊拉伤后第7天（0.335±0.095 a.u vs.0.169±0.003 a.u,P=0.039）和第14天（0.344±0.022 a.u vs.0.195±0.030 a.u,P=0.002）,移植内皮祖细胞可以显著促进再内皮化。在球囊拉伤后第14天时,与对照组相比,移植内皮祖细胞可以显著减少新生内膜增殖体积（0.105±0.008 mm~3 vs.0.078±0.014 mm~3,P=0.044）。内皮祖细胞在体外培养时可以分泌血管内皮生长因子、转化生长因子-β1、胰岛素样生长因子-1等细胞因子,移植后大鼠血清中血管内皮生长因子（7.673±0.546 pg/m L vs.2.455±0.492pg/m L,P＜0.001）和胰岛素样生长因子-1（20829.553±3925.356 pg/m L vs.5953.253±2364.436 pg/m L,P=0.004）的含量较不移植显著增加。结论:移植内皮祖细胞具有趋化性,可以趋化黏附到损伤血管管腔表面。尽管在球囊拉伤后第4天开始,损伤血管管腔表面的移植内皮祖细胞显著减少,但移植仍然促进了再内皮化、遏止新生内膜增殖和炎症浸润。其机制主要是移植内皮祖细胞通过旁分泌细胞因子促进血管损伤的修复。
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