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目的急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性粒细胞白血病(AML)中的一个特殊亚型,在早期常伴有严重的凝血异常,是APL患者早期死亡的主要原因。组织因子在凝血过程中发挥着重要的作用。异常剪接组织因子(alternatively spliced tissue factor,as TF)作为组织因子的一种可溶性剪接体,其在凝血过程中发挥的作用尚有争议,且其与肿瘤的进展、转移及肿瘤新生血管形成有着一定的关系,目前有关APL患者中的as TF表达未见报道。本研究旨在建立as TF表达量的检测方法,并对初治APL患者as TF进行检测,比较初诊APL患者和缓解(CR)后APL患者as TF的m RNA水平的表达情况,并探讨其临床意义。方法(1)采用Primer Express 2.0设计as TF引物,通过在不同温度下对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4 as TF及内参基因标准曲线的检测,建立荧光染料实时定量PCR检测as TF表达量的方法,并对其进行验证。(2)作为分析as TF m RNA表达水平与APL患者外周血白细胞数的关系:Spearman’s相关性分析as TF与APL患者白细胞数之间的相关性。采用荧光染料实时定量PCR(q RT-PCR)技术动态检测33例APL患者治疗前和缓解后外周血as TF m RNA水平表达情况,并与15例非APL急性粒细胞白血病患者及15例正常健康者外周血as TF m RNA表达水平进行比较分析。结果(1)成功建立了采用q PCR技术检测as TF m RNA方法,并对其进行验证,证实了用该引物检测as TF表达量的可行性。(2)as TF m RNA表达水平与APL患者外周血白细胞的关系:as TF与APL患者外周血白细胞无相关性(P>0.05),排除了白细胞数对as TF表达量的影响。as TF m RNA表达水平:APL患者缓解后as TF m RNA水平表达高于治疗前(P<0.05),正常健康者和非APL的AML患者as TF表达量均高于APL患者治疗前(P<0.01),但非APL的AML患者与正常健康者之间as TF表达量未见明显差异(P>0.05)。结论(1)成功建立了q PCR技术检测人外周血as TF m RNA的方法。(2)as TF在APL患者缓解后的表达高于治疗前,正常健康者as TF表达明显高于治疗前APL患者,而缓解后总TF m RNA水平较治疗前处于低水平,提示as TF在APL患者中凝血作用较fl TF低,并推测PML/RARa可能是打破APL患者体内fl TF和as TF平衡的根本原因。