蛋白与材料表面微观及宏观的粘附行为研究

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蛋白质的粘附行为频繁发生在多种生物活动中,已知蛋白质的粘附行为在细胞增殖和生长、微生物定植、血小板粘附与血栓形成等众多生物反应中发挥重要作用。从组织工程的角度来看,某些蛋白质与生物材料表面的良好粘附有助于细胞粘附和增殖,促进受损组织的再生及愈合,因此研究蛋白质与材料表面的粘附行为具有重要意义。本文分别对与二氧化硅(Si O2)和聚丙烯(PP)具有粘附作用Si-Tag蛋白和LCIM1蛋白的粘附行为进行研究。Si-Tag蛋白由于含有大量正电荷,可以与硅羟基(-Si OH)之间产生静电作用,且Si-Tag蛋白不具有固定的三维结构,在粘附时会发生自适应形变,从而使得Si-Tag蛋白和Si O2之间具有较强的粘附力。但单个Si-Tag蛋白与Si O2的粘附力究竟多大,这种微观条件下强的粘附力是否在宏观条件下依旧存在尚不清楚。本课题以探究Si-Tag蛋白对Si O2表面的粘附力大小及在宏观条件下这种强的粘附行为是否依然存在为目的,使用原子力显微镜的单分子力谱技术研究了微观条件下重组Si-Tag蛋白对Si O2玻片的粘附行为,同时以巯基与马来酰亚胺功能化的聚乙二醇(PEG)聚合物为原材料制备的水凝胶为载体,通过将重组的Si-Tag蛋白修饰在水凝胶上,借助微力测量天平为研究宏观条件下水凝胶对Si O2基底的粘附行为。实验结果表明微观条件的Si-Tag蛋白对Si O2玻片粘附力大小为597 p N,宏观条件下的修饰了Si-Tag蛋白的水凝胶对Si O2玻片粘附力为118.68 N/m~2,而使用不含有Si-Tag蛋白的蛋白修饰水凝胶的粘附力仅仅只有3.16N/m~2。结果表明Si-Tag蛋白对Si O2玻片的强粘附力在宏观条件下依旧存在。此外通过同样的实验方法研究了LCI的改性蛋白LCIM1的重组蛋白对PP的粘附行为。LCI蛋白是一种抗菌肽,同时也是一种表面聚合物结合肽,对PP具有明显的粘附行为。对LCI蛋白改性可以增加对PP的粘附从而实现功能化PP的目的。单分子力谱的实验结果表明微观条件下LCIM1对PP的粘附力大小为60 p N,而微力测量天平的结果表明宏观条件下的LCIM1对PP的平均粘附力为345.66 N/m~2。这说明在宏观条件下LCIM1对PP有较强的粘附力。本课题的研究结果定量了Si-Tag蛋白与Si O2在微观与宏观条件下的粘附力,同时定量了LCIM1与PP在微观与宏观条件下的粘附力,为开发这两种蛋白的其他生物功能提供重要基础,具有作为原子力显微镜中单分子力谱中的指纹图谱或功能化Si O2或PP等材料的结合标签的应用潜质,同时也为其他蛋白的粘附行为研究提供重要思路。
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