论文部分内容阅读
本试验研究不同NFC/NDF水平日粮对青海黑藏羊瘤胃发育及瘤胃内环境的影响,旨在为青海黑藏羊合理的日粮NFC/NDF水平的配置提供理论依据。试验选取健康且体况相近的黑藏羊公羔60只(2月龄断奶)平均体重10.45±0.96kg。试验采用单因素随机区组设计,随机分为H组、M组和L组,分别饲喂NFC/NDF水平为1.82、1.16和0.71的日粮,每组20只,组内5个重复。试验期127 d,其中预饲期7 d,正试期120 d。试验结束后,从每组中随机选取5只试验羊屠宰,采集瘤胃组织制作冷冻切片,测量瘤胃角质层、瘤胃颗粒层、肌层厚度、乳头长度、乳头宽度;采集瘤胃组织提取总RNA,q RT-PCR测定瘤胃上皮组织发育、吸收代谢、屏障功能、炎症相关基因相对表达量;于同一部位分别取瘤胃内容物用于测定瘤胃抗氧化能力、消化酶活性、瘤胃发酵参数及细菌多样性。结果表明:1)M组和H组瘤胃的角质层厚度和肌层厚度显著小于L组(P<0.05);M组瘤胃的颗粒层厚度显著大于H组(P<0.05);M组瘤胃的乳头长度显著大于H组(P<0.05);M组瘤胃的乳头宽度显著大于L组和H组(P<0.05);各组间瘤胃的中央肌层厚度差异不显著(P>0.05),但随着日粮NFC/NDF水平降低呈增大趋势。综上所述,日粮NFC/NDF水平为1.16时瘤胃组织形态发育状态最好。2)以M组为对照组,M组IGFBP-1、IGF-1 m RNA表达量与H组和L组相比差异均不显著(P>0.05),但H组IGFBP-1、IGF-1 m RNA表达量显著高于L组(P<0.05);H组MCT1、NHE1、PPARA、SLC14A1、HMGCS2 m RNA表达量呈上升趋势(P<0.10),M组N+/K+-ATPase m RNA表达量显著低于H组(P<0.05),且显著高于L组(P<0.05);H组与L组ZO-1、claudin-1、claudin-4m RNA表达量显著低于M组(P<0.05),各组desmoglein m RNA表达量差异不显著(P>0.05);H组与M组瘤胃上皮炎症基因IL-6 m RNA表达量显著高于L组(P<0.05)。综上所述,当日粮NFC/NDF水平为1.16时,瘤胃发育程度、吸收代谢、屏障功能综合状态最佳。3)H组、M组、L组三组的GSH-Px活性差异不显著(P>0.05),H组的SOD活性显著高于M组和L组(P<0.05),H组的T-AOC、CAT活性均显著低于M组和L组(P<0.05),M组的MDA含量显著低于H组和L组(P<0.05);H组的α-淀粉酶活性显著高于L组(P<0.05),L组的纤维素酶活性显著高于H组和M组(P<0.05),M组的脂肪酶活性显著高于H组和L组(P<0.05),L组的糜蛋白酶活性显著低于H组和M组(P<0.05),H组、M组、L组三组的胰蛋白酶活性差异不显著(P>0.05)。综上所述,日粮NFC/NDF水平为1.16时青海黑藏羊瘤胃抗氧化能力最强且消化酶活性最高。4)M组瘤胃液p H显著高于H组且显著低于L组(P<0.05);H组瘤胃液NH3-N含量显著高于L组且显著低于M组(P<0.05);M组瘤胃液MCP含量显著高于L组且显著低于H组(P<0.05);M组瘤胃液乙酸含量显著高于H组且显著低于L组(P<0.05);L组的VFA含量显著高于H组和M组(P<0.05);3组瘤胃液乙酸/丙酸的比值差异显著(P<0.05)。97%的一致性共得到1463个OTUs;门水平下,Bacteroidetes、Firmicutes是3组的优势菌门,Proteobacteria在L组的丰度显著高于H组和M组(P<0.05);属水平下,Prevotella_1是3组的优势菌属,Ruminococcus_2、Butyrivibrio_2、Prevotellaceae_NK3B31_group在L组的丰度显著高于H组(P<0.05),Lachnoclostridium_1、Prevotellaceae_Ga6A1_group、probable_genus_10在L组的丰度显著低于H组(P<0.05),Butyrivibrio_2、Acetitomaculum、Moryella在L组的丰度显著高于M组(P<0.05)。瘤胃发酵参数和瘤胃细菌相关性分析:共性优势菌门Bacteroidetes与p H、Acetic Acid、VFA均呈正相关,与其他指标呈负相关;而Firmicutes与Bacteroidetes与发酵参数指标的相关性恰好相反。次优势菌门Proteobacteria与NH3-N呈显著正相关,与Butyric Acid呈显著负相关;Patesicbacteria与Butyric Acid呈显著负相关,与VFA极显著负相关;Tenericates与VFA呈显著负相关;Synergistetes与Propanoic Acid呈显著正相关。综上所述,不同NFC/NDF水平日粮会改变黑藏羊瘤胃发酵类型,同时会影响瘤胃微生物组成及多样性。综上所述,不同NFC/NDF水平日粮会影响黑藏羊瘤胃组织形态的发育,会影响瘤胃发育程度、吸收代谢、屏障功能等相关基因的表达量,会影响瘤胃抗氧化能力及消化酶活性,同时会影响黑藏羊瘤胃发酵类型及瘤胃细菌的多样性。综合来看,当日粮NFC/NDF水平为1.16时,瘤胃发育状态及瘤胃内环境稳态最佳。