【摘 要】
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目的 探究体外低剂量电离辐射对骨髓来源的内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）诱导骨髓间充质干细胞（bonemarrow mesenchymal stem cells,BMSCs）定向迁移能力的影响及其可能相关的信号通路机制。方法 鉴定细胞纯度后首先使用不同剂量的X线照射EPCs。通过细胞计数观察EPCs的增殖变化,通过Transwell实验观察照射对EP
【基金项目】
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2020年度江苏省研究生科研与实践创新计划:《低剂量X线照射促进EPCs分泌VEGF诱导BMSCs归巢的机制研究》（项目编号:SJCX20 1072）；
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目的 探究体外低剂量电离辐射对骨髓来源的内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）诱导骨髓间充质干细胞（bonemarrow mesenchymal stem cells,BMSCs）定向迁移能力的影响及其可能相关的信号通路机制。方法 鉴定细胞纯度后首先使用不同剂量的X线照射EPCs。通过细胞计数观察EPCs的增殖变化,通过Transwell实验观察照射对EPCs诱导迁移能力的影响,从而挑选出照射EPCs的最佳剂量。接着通过ELISA实验检测经X线照射后EPCs分泌VEGF随时间的变化情况。通过Western Blot实验验证最佳剂量的X线照射对EPCs中的MAPK/ERK信号通路产生的影响。最后,通过Western Blot、ELISA、Transwell方法检测MAPK/ERK通路抑制剂产生的影响。结果 细胞计数结果显示:不同剂量的X线照射对EPCs的增殖产生不同的影响,其中75mGy的低剂量X线照射能够明显促进EPCs的增殖（P＜0.05）。Transwell结果显示:经75mGy的X线照射后,照射组中迁移至下室的BMSCs数量多于未照射组（P＜0.05）,而在添加MEK抑制剂后,被迁移的BMSCs数量出现减少（P＜0.05）。ELISA结果显示:75mGy的X线照射可以促进EPCs分泌VEGF且在照射后第5天时最明显（P＜0.05）,添加MEK抑制剂可以抑制VEGF的分泌。Western Blot结果显示:75mGy的X线照射可以上调EPCs中的ERK1/2磷酸化水平,而MEK抑制剂可以有效抑制ERK1/2的磷酸化水平。结论 本研究显示75mGy的X线照射可在一定程度上促进EPCs增殖以及分泌VEGF。低剂量电离辐射可以在体外增强EPCs对BMSCs的诱导迁移作用,其机制可能与MAPK/ERK信号通路激活有关。
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