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本课题以四川绵阳地区银杏叶为研究对象,探讨银杏叶内生真菌的分离方法,研究银杏叶内生真菌的多样性,并对银杏叶内生真菌进行抗菌性和生物学特性的研究,研究得出:
在分离银杏叶内生真菌时:银杏叶表面消毒在以75%的乙醇消毒90S后,再以0.1%的升汞进行消毒时,升汞的最佳消毒时间为5min;组织培养法比组织研磨法更简便和适宜;选择性分离试剂氯霉素的最佳浓度为500mg/L。
分离自银杏叶的480株内生真菌,按经典形态系统分类学方法鉴定为:子囊菌、胶孢炭疽菌、球壳孢科、炭疽菌属、毛壳菌属、黑孢霉属、交链孢属和拟盘多毛孢菌属。并首次从银杏叶中分离到子囊菌AS0菌株。
抗菌性研究表明两株球壳孢菌和两株胶孢炭疽菌对大肠杆菌的抑制效果很明显,对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌也有一定的抑制作用。
银杏叶内生真菌在PDA平板上生长都比较快,仅子囊菌A50菌株较慢。菌株A114、A50和05-27的生物学培养特性研究表明:三株菌在马铃薯葡萄糖液体培养基中生长均最好、菌丝产量最高,在pH4.0-8.5的培养基中都能生长;A114菌株最佳氮、碳源分别为酵母粉和葡萄糖,最适pH为6.6;A50菌株最佳氮、碳源分别为蛋白胨和可溶性淀粉,最适pH为6.9;而05-27菌株最佳氮、碳源分别为酵母粉和葡萄糖,最适pH为6.9。