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目的：卵巢癌SKOV-3细胞株转染Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein, RKIP)基因后,观察细胞在抗肿瘤药物顺铂作用下的增殖、凋亡及周期情况,研究RKIP对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响,初步探讨RKIP抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡可能的机制。方法：1.应用脂质体转染法,将含有人全长RKIP的真核表达重组质粒导入卵巢癌细胞株SKOV-3中,并设置未转染SKOV-3细胞和空质粒转染细胞做对照,使用G418筛选阳性细胞。2.应用免疫印渍(Western Blot)检测脂质体转染前后人卵巢癌SKOV-3细胞的RKIP蛋白表达水平。3.应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测脂质体转染前后人卵巢癌SKOV-3细胞的mRNA表达水平。4.应用单溶液增殖检测法(MTS)观察RKIP在顺铂作用下对人卵巢癌细胞增殖的抑制作用。5.应用流式细胞术(FCM)观察RKIP在顺铂作用下对人卵巢癌细胞诱导凋亡情况以及对细胞周期的影响结果：1.通过脂质体转染质粒,成功构建RKIP表达上升的卵巢癌SKOV-3细胞株,以及对应的空质粒的细胞株。2.不同浓度顺铂(0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml和10μg/ml)作用24、48、72hrs均能抑制SKOV-3细胞的增殖,但RKIP转染后增殖抑制与未转染组照组比较均有显著性差异(P<0.05),顺铂对转染RKIP组SKOV-3的抑制更为明显,增殖抑制率明显上升。3.浓度为2.5μg/ml的顺铂作用24hrs后,转染组凋亡率为(10.86±0.73)%,明显高于其他实验组[未转染组(4.27±0.67)%,转染空质粒组(4.02±0.43)%],在无顺铂作用情况下,凋亡率为(3.11±0.78)%,仍然高于未转染组(1.51±0.13)%和转染空质粒组(1.97±0.46)%,结果有显著性差异(P<0.01)。4.浓度为2.5μg/ml的顺铂作用24hrs后,经周期检测G0/G1期的比例下降,S期的比例增加,与对照组比较有显著性差异(P<0.05), RKIP基因的转染促进了卵巢癌细胞S期阻滞。结论：过表达RKIP对卵巢癌SKOV-3细胞株产生了一系列影响,可以增加顺铂对肿瘤细胞增殖抑制率,增加顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的敏感性,并影响肿瘤细胞的细胞周期,促进了SKOV-3细胞阻滞于S期,延长DNA的复制修复期。