卵黄抗体（Egg yolk antibody,IgY）近年来已广泛运用于我国的畜牧生产业。与抗生素相比,IgY在防治动物细菌性疾病方面具有安全无残留、无耐药性的优势,而且能够显著提高动物的生产性能。据国外研究发现,IgY在适宜条件下,能够被胃蛋白酶酶解,生成Fab’和pFc’片段。酶解后的Fab’片段仍具有与抗原结合的活性,而pFc’片段继续被酶解为无任何生物学活性的pFc’小分子碎片。国内研究者通过改变IgY酶解pH值,胃蛋白酶和IgY质量比,反应时间等因素,对IgY最适酶解条件进行了进一步的探索。与完整的IgY分子相比,Fab’片段在动物疾病防治方面更具有应用价值。本试验研究内容分以下两个部分:试验Ⅰ传染性法氏囊病卵黄抗体Fab’片段制备工艺的响应面优化设计本试验利用胃蛋白酶酶解IgY,通过考察pH值、胃蛋白酶与IgY质量比、酶解时间,三个因素对Fab’片段制备量的影响,利用SDS-PAGE、Western blotting确定了能够制备Fab’片段的适合条件,即在胃蛋白酶质量:IgY质量≥0.2,反应8 h时,IgY能够被完全酶解。为优化Fab’片段的制备工艺,选取胃蛋白酶与IgY质量比、酶解时间这2个因素,进行响应面中心组合设计试验。结果表明:Fab’片段优化制备工艺为pH 4.0,温度37℃,胃蛋白酶和卵黄抗体质量比0.54:1（反应比432:1 U/mg）,酶解时间8.5 h,在该条件下能够得到最大量的Fab’片段。称取IgY冻干粉1.36 g,在优化条件下反应,SDS-PAGE分析酶解产物,结果显示,IgY能够被彻底分解成Fab’和无生物学活性的pFc’小分子碎片;利用BCA蛋白检测试剂盒检测酶解溶液蛋白浓度,结果显示,酶解溶液蛋白浓度为2.40 mg/mL,Fab’溶液中所含蛋白质量为1.308 g,占原IgY冻干粉的96.18%,用于不同浓度Fab’注射液的制备。试验Ⅱ Fab’片段防治鸡传染性法氏囊病的临床试验本部分利用优化条件下制备的Fab’溶液制成Fab’冻干粉末,将其溶于生理盐水制成不同浓度（20mg/mL、10mg/mL、5 mg/mL）的Fab’注射液,用于鸡传染性法氏囊病毒（Infectious bursal disease virus,IBDV）临床防治试验。试验结果表明,10 mg/mL中剂量Fab’注射液通过肌肉注射,可治疗雏鸡IBDV感染,与病毒对照组相比,其可极显著提高法氏囊指数和降低脾脏指数（P<0.01）。20 mg/mL高剂量Fab’注射液可用于预防雏鸡IBDV早期感染造成的法氏囊肿大现象,与空白对照组相比,其法氏囊指数和脾脏指数无显著差异（P>0.05）。本研究成功探究了在多种因素共同作用条件下能实现Fab’片段产量最大化的优化条件。该方法获得Fab’片段产量最大,减少了资源浪费,提高了制备Fab’片段的工艺效率,为Fab’片段的规模化生产打下基础。同时,本研究利用制备得到的Fab’冻干粉进行了临床试验,证明了一定剂量的Fab’片段对鸡传染性法氏囊病具有防治作用,为Fab’的临床应用提供了理论依据。