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本研究以新西兰大白兔为实验对象,将HHK人工腱植入离断的兔跟腱。采用组织学、生物力学、分子生物学等技术观察自生腱形成过程中的自生腱的形态学和拉应力的变化以及某些因子的表达,探讨人工腱诱导自生腱形成的机理,为HHK人工腱的临床应用和基础研究提供理论依据。 研究内容分为三部分: 一、HHK人工腱植入后形态学的变化。取植入后第1、3、6、9、12、16、20周人工腱标本,以正常肌腱为正常对照。光镜、电镜观察显示,活化的腱细胞胞质内粗面内质网丰富,高尔基复合体发达,具有蛋白质分泌细胞的超微结构特点。尚可见巨噬细胞、多核巨细胞聚集在人发周围,胞质内可见吞噬的人发碎片。第12周人发被完全降解。胶原纤维逐渐有少变多,由疏松紊乱变得致密规则。 二、HHK人工腱植入后拉应力的变化。取植入前人工腱、正常肌腱、植入后第9、12周的自生腱标本,测量其拉应力强度。结果显示,植入前人工腱的拉应力高于正常肌腱,植入后第9周,自生腱的拉应力强度很弱,主要是靠未被降解的HHK人工腱组分来维持。植入后第20周,自生腱的拉应力达到正常肌腱的58.7%,已能适应一定强度的体力活动。 三、HHK人工腱植入后某些因子的变化。取植入后第3、6、9、12、16、20周自生腱及正常肌腱标本,通过RT-PCR技术测量Ⅰ型胶原,MMP-1,TIMP-1,TGF-β1,bFGF等细胞因子的mRNA水平。结果表明,Ⅰ型胶原合成增加(P<0.05)。正常肌腱组织MMP-1和TIMP-1无表达。植入后第6周呈低表达,第9周达高峰,第20周表达又降低,且MMP-1/TIMP-1比值逐渐减低;细胞因子TGF-β1和bFGF实验组的表达高于对照组(P<0.05),且植入后第20周bFGF表达量较高。 实验结果提示:人发的降解是由单核吞噬细胞系统来完成。人发在巨噬细胞、多核巨细胞、腱细胞等细胞分泌的特殊因子作用下裂解成碎片,最终被巨噬细胞、多核巨细胞吞噬降解。自生腱的形成是腱细胞和细胞因子共同作用的结果。两断端肌腱的腱细胞迁移至HHK人工腱。在TGF-β1和bFGF的作用下,腱细胞增殖活化,分泌胶原蛋白,合成胶原纤维,且bFGF促进血管增殖。植入后期,自生健的重塑由胶原酶和拉应力的共同作用来完成。