肺癌胸腔积液和结核性胸腔积液的蛋白质组学研究

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研究目的:针对肺癌和结核性胸腔积液分别进行质谱分析,鉴定其中包含的蛋白质种类。分析其蛋白质组构成特点。对每种蛋白质在不同的胸腔积液中进行相对定量比较,寻找具有鉴别诊断价值的蛋白质标志物。研究背景:在中国,肺癌和结核是发病率极高的常见病、多发病。胸腔积液患者中,肺癌胸膜转移和结核性胸膜炎是最常见的诱因。两种不同病因引起的胸腔积液却有着极为相似的理化特征,从而导致大量的误诊、误治。因此如何鉴别肺癌胸腔积液和结核胸腔积液具有重要的临床价值。研究方法:1、收集明确诊断的结核性胸腔积液和肺癌胸腔积液患者的胸腔积液样本。2、采用一维凝胶电泳分离样本中的蛋白质。3、根据蛋白质条带分布切胶,胶上胰酶酶切。4、使用二维纳升液相色谱串联电喷雾飞行时间质谱(Nano-HPLC-ESI-QTOF-MS/MS)进行蛋白质鉴定。5、分别对结核性胸腔积液和肺癌胸腔积液进行蛋白质的功能富集分析。6、再比对两种样本的蛋白质,寻找出可能作为鉴别诊断标志物的差异蛋白质。研究结果:1、结核性胸腔积液每个样本间一维凝胶电泳蛋白质条带分布差别较小,而肺癌胸腔积液每个样本间的差异较结核性胸腔积液明显。2、结核和肺癌胸腔积液中富集程度最高的蛋白质是来自于血浆的参与凝血、急性炎症反应的蛋白质。除此之外,结核性胸腔积液样本中,参与细胞周期和细胞运动的蛋白质明显富集。肺癌胸腔积液样本中参与Ras信号通路和DNA甲基化的蛋白质明显富集。3、结核性胸腔积液样本中能检测到结核菌大膜蛋白1(MMPL1)和Rv2567两种结核菌蛋白质,而载脂蛋白L、补体C1q的B组亚单位、无花果酶3、触珠蛋白、触珠蛋白相关蛋白、白介素1α、凝血酶原等7种人类蛋白质在结核和肺癌胸腔积液样本中的表达水平有显著差异。结论:1、肺癌胸腔积液蛋白质组成异质性比结核性胸腔积液明显。2、两种胸腔积液的蛋白质组特征上存在差异,这些差异与细胞生长和肿瘤信号通路相关。3、有2种结核菌蛋白质和7种人蛋白质有可能成为鉴别诊断肺癌和结核性胸腔积液的蛋白标志物。
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