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目的:研究纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及其受体α5整合素(α5-integrin)在自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉平滑肌细胞(VSMCs)体外培养过程的衰老、钙化中的作用,探讨高血压大鼠来源的血管平滑肌细胞的体外衰老、钙化机制。方法:12周龄的SHR和WKY大鼠VSMCs体外培养,第三代用于实验中。按是否应用外源性FN包被、整合素受体阻断剂GRGDSP进行如下分组:SHR-FN组(S-F组)、SHR-GRGDSP组(S-G组)为实验组,而SHR组(S组)和WKY组(W组)为对照组。分别应用细胞衰老β半乳糖苷酶染色、von kossa染色、免疫细胞化学染色研究培养3d、6d、9d、12d VSMCs衰老、钙化的动态变化和FN、EDA-FN、α5-integrin的动态表达变化。应用Western blot比较W组和S组3d、6d、9d和12d VSMCs、各组培养12d时VSMCs和S组VSMCs经不同浓度FN包被培养12d的ALP的表达水平以评估VSMCs的表型转化。结果:(1)VSMCs衰老:各组VSMCs衰老程度随着培养时间的延长而增加(3d<6d<9d<12d)。3d时,S组和W组无明显差别(P>0.05),6d、9d、12d时,S组大于W组(P<0.05);同一时间点,S-F组大于S组(P<0.05);S-G组小于S组(P<0.05)。(2)VSMCs钙化:各组VSMCs钙化水平随培养时间的延长而增加(3d<6d<9d<12d);3d时,S组和W组无明显差别(P>0.05),6d、9d、12d时,S组大于W组(P<0.05);同一时间点,S-F组大于S组(P<0.05);S-G组小于S组(P<0.05)。(3)VSMCs的FN、EDA-FN、α5-integrin表达变化:三种蛋白在各组VSMCs表达随培养时间延长而上调(3d<6d<9d<12d)。(1)FN、EDA-FN表达:3d时,S组和W组无明显差别(P>0.05),6d、9d、12d时,S组大于W组(P<0.05);同一时间点,S-F组大于S组(P<0.05);S-G组和S组无明显差别(P>0.05)。(2)α5-integrin表达:同一时间点,S组大于W组(P<0.05),S-F组大于S组(P<0.05);S-G组和S组无明显差别(P>0.05)。(4)ALP表达变化:(1)W组和S组:随着培养时间延长,ALP表达逐渐上调,S组在3d时与W组无明显差别(P>0.05),而6d、9d、12d分别高于W组(P<0.05)。(2)12d时:S组高于W组(P<0.05);S-F组高于S组(P<0.05);S-G组低于S组(P<0.05)。(3)不同浓度外源性FN(5ug/cm2、10ug/cm2、15ug/cm2)包被S组的VSMCs12d后,随FN浓度增加,ALP表达上调(P<0.05)。结论:SHR比WKY大鼠来源的VSMCs在体外更易于衰老和钙化,其机制可能为高血压时VSMCs的FN及其亚型EDA-FN、α5-integrin表达上调,增加FN和整合素受体的结合,而诱导VSMCs向成骨细胞表型转化。