研究目的:　　 检测食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE-1中Notch受体表达，观察γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对体外培养的Eca109和TE-1细胞增殖和凋亡的影响，进一步探讨其作用机制，为靶向Notch通路治疗食管鳞状细胞癌提供理论依据。　　 研究方法:　　 (1)采用qRT-PCR检测体外培养的食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE-1中Notch受体及下游靶基因Hes-1在DAPT处理前、后的表达情况。　　 (2)应用CCK8法检测DAPT阻断Notch信号对食管鳞状细胞癌Eca109和TE-1细胞增殖的影响。　　 (3)通过流式细胞分析技术检测DAPT阻断食管鳞状细胞癌Eca109和TE-1细胞株Notch受体后的细胞凋亡和周期情况，评价阻断Notch信号对细胞凋亡和周期的影响。　　 (4)Westernblotting检测DAPT阻断食管鳞状细胞癌Eca109和TE-1细胞株Notch受体后，与细胞增殖、凋亡有关蛋白CyclinD1和Bcl-2的变化，初步探讨DAPT对食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE-1增殖和凋亡影响的作用机制。　　 研究结果:　　 (1)体外培养的食管鳞状细胞癌Eca109和TE-1细胞株，除Notch-4几乎不表达外，Notch-1、Notch-2和Notch-3均有一定量的表达，其中Notch-2相对于Notch-1和Notch-3有更高的表达。Notch下游靶基因之一的Hes-1也有一定量表达。　　 (2)在DAPT处理后，Eca109和TE-1细胞Notch-1、Notch-3和Notch-4的表达水平变化不明显，但Notch-2表达水平在DAPT作用6h后即明显降低，下游靶基因Hes-1表达水平也显著降低。　　 (3)DAPT明显抑制食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE-1细胞的体外增殖，并呈时间、剂量依赖关系。　　 (4)DAPT阻断Eca109和TE-1细胞株中Notch信号通路后，两株细胞凋亡率明显增加。　　 (5)DAPT处理后的两株细胞G0/G1期所占百分比增多，细胞周期素蛋白CyclinD1水平均降低，但Bcl-2蛋白表达水平呈现相反的变化，在TE-1细胞中表达降低，而在Eca109细胞中表达增高。　　 研究结论:　　 食管鳞状细胞癌细胞株Eca109和TE-1中存在Notch受体表达，Notch信号通路活化。Y-分泌酶抑制剂DAPT处理使Eca109和TE-1细胞增殖能力降低，同时诱导了细胞的凋亡。其机制可能与DAPT抑制Notch信号活化、调控CyclinD1和Bcl-2表达及阻滞细胞周期有关，但Eca109细胞可能还有除Bcl-2外的信号通路参与。　　 实验为阻断Notch信号通路治疗食管鳞状细胞癌提供了新的理论依据，针对某一种Notch信号的治疗有望为食管鳞癌靶向治疗提供新的方向。