类钙调神经素B亚基蛋白（CBL）是植物中普遍存在的一种钙感受器家族。很多研究表明CBL在植物响应生物胁迫和非生物胁迫中起着至关重要的作用。因此，它被认为是基因抗逆育种工作中很重要的候选基因。　　本研究旨在从林烟草中分离CBL基因并对其进行功能验证。主要工作内容如下：　　1.利用同源克隆的策略，从林烟草的叶片中获得一个基因。进化树分析表明该基因与其它物种中的CBL2基因在同一个分支上。因此将其命名为林烟草CBL2基因。多序列比对分析表明林烟草CBL2蛋白与拟南芥CBL2蛋白的序列相似度高达89.38％，与杨树、水稻和玉米CBL2蛋白的序列相似度分别为86.22%、84.00%、48.21%。　　2. NsylCBL2的CDS序列全长为675 bp，编码一个由223个氨基酸组成的蛋白质，其基因组包括7个内含子和8个外显子。NsylCBL2的4个EF手型结构之间的距离分别为23、25和32个氨基酸。生物信息学分析表明NsylCBL2的结构和理化性质与其它物种中CBL2相似。　　3.通过浸花法将NsylCBL2转入拟南芥中，对T1代植株进行RCR阳性鉴定和RT-PCR表达量检测，对T2和T3代植株进行抗性筛选，T3代纯合株系用来进行NsylCBL2的功能验证，拟南芥cbl2突变体从TAIR上订购并进行了T-DNA插入验证。　　4.已有研究表明CBL2基因参与盐和镁的信号转导，因此本试验也进行了高盐和高镁处理，来检测NsylCBL2是否也具有这样的功能。但是萌发、表型观察和生理数据表明过表达NsylCBL2拟南芥植株、突变体与野生型在这些处理下没有明显差异。因此， NsylCBL2可能不参与盐与镁的信号转导。　　5.另一方面，pCHF3-NsylCBL2这个质粒通过叶盘转化法侵染到烟草里面。过表达转基因烟草就已经获得，并且表达量水平高于普通烟草。从转基因烟草收到种子后做特定的抗性筛选检测测试，获得符合3:1比例的T1代，然后种到温室获得T2代，供以后的实验做准备。　　6.获得NsylCBL2的启动子序列并对其进行了预测分析，发现其含有多种逆境和激素相关转录因子。构建了NsylCBL2启动子与GUS基因融合的表达载体pBI101-CBL2pro。　　本研究是对NsylCBL2基因的首次报道。因此，本研究期望能给NsylCBL2今后的研究提供一定的指导。