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天然磷脂具有很多重要的生理功能,是一种药用价值较高的活性物质,现已被广泛应用于营养、医药、化妆品等领域,这些领域所需皆为高纯的磷脂单体产品。因此,市场对高纯磷脂单体产品的需求量越来越大。由于高纯磷脂的分离纯化难度较大,在磷脂单体产品中,除卵磷脂能采用相对简便的柱色谱法制备外,其他磷脂单体产品均需高效液相色谱法(HPLC)制备,而传统的HPLC法采用淋洗模式,存在上样量小、消耗溶剂量大、产品浓度低、生产成本昂贵等缺点,造成磷脂单体产品价格高昂。如何降低生产成本,是解决高纯磷脂单体能否满足医药等领域大量需求的关键。本论文针对我国磷脂的利用现状,以大豆油脚为原料,从制备方法入手,研究了简单淋洗体系的柱色谱法和适合于制备分离的置换色谱法分离纯化磷脂产品,以促进天然磷脂的开发和利用。主要研究内容如下:1.溶剂萃取法和柱色谱技术相结合从大豆油脚中分离纯化大豆肌醇磷脂(PI)研究。以大豆油脚为原料,经脱水、脱油处理,再经95%乙醇浸提后得到醇不溶物,然后进一步采用柱色谱技术进行分离,制备得到高纯大豆肌醇磷脂。以产品纯度和回收率为指标,考察了流动相溶剂组成及上样量两因素对分离效率的影响。实验结果表明:在层析硅胶固定相上,以氯仿-甲醇(1.8:1,V/V)为流动相进行等度洗脱,最佳上样量为1.0g/100g硅胶。此条件下纯化得到的肌醇磷脂产品纯度可达91.5%,回收率为90%左右;当以二醇基键合硅胶填料为固定相,氯仿-甲醇2:1(V/V)为流动相等度洗脱,上样量为1.2g/100g二醇基键合硅胶填料时,可获得高纯度的PI(>90%),回收率达到90%以上。2.首次在低压制备型Φ12.5mm×200mm自装二醇柱上,探索研究卵磷脂(PC)、脑磷脂(PE)和肌醇磷脂(PI)三元混合物的置换色谱分离纯化技术。从制备的角度出发,以纯度和回收率为指标,考察了置换剂浓度、置换剂流速及上样量等色谱条件对分离效果的影响。建立了以二氯甲烷-甲醇(9:1,V/V)为流动相,置换剂浓度为7.5%(V/V),置换剂流速为0.4ml/min,上样100mg的置换体系。PE、PC、PI纯度分别为78.8%、45.3%、84%,其回收率分别为48.4%、81.6%、65.9%。