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目的:通过比较分析结核分枝杆菌Pho PR双组分系统(包括Pho P基因、Pho R基因、Pho P/Pho R基因)分别在新疆地区流行的结核分枝杆菌药物敏感菌株(不耐药菌株)、单纯耐一线抗结核药物(包括异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇)的结核分枝杆菌临床分离株、耐多药的结核分枝杆菌临床分离株中缺失突变后对各组结核分枝杆菌临床分离株耐药性的影响,探讨结核分枝杆菌PhoPR双组分系统对其耐药性的调控作用。方法:基于融合PCR技术以及T载体克隆技术,构建并鉴定各基因的置换型缺失突变载体T-Pho P、T-Pho R和T-Pho PR;利用电穿孔技术将各基因的置换型缺失突变载体分别电转化至各组结核分枝杆菌临床分离株,并鉴定;利用刃天青显色法测定各组结核分枝杆菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC),比较分析结核分枝杆菌Pho PR双组分系统基因缺失突变对其耐药性的影响,并探讨其调控作用。结果:1.成功构建及鉴定各基因置换型缺失突变载体T-Pho P、T-Pho R和T-Pho PR;2.成功构建Pho P基因缺失突变菌株:Drug-sensitive-MTB△Pho P、INH-MTB△Pho P、RFP-MTB△Pho P、SM-MTB△Pho P、EB-MTB△Pho P和MDR-MTB△Pho P,Pho R基因缺失突变菌株:Drug-sensitive-MTB△Pho R、INH-MTB△Pho R、RFP-MTB△Pho R、SM-MTB△Pho R、EB-MTB△Pho R和MDR-MTB△Pho R,Pho P/Pho R基因缺失突变菌株:Drug-sensitive-MTB△Pho PR、INH-MTB△Pho PR、RFP-MTB△Pho PR、SM-MTB△Pho PR、EB-MTB△Pho PR和MDR-MTB△Pho PR;3.与原始耐药结核分枝杆菌菌株相比,各组耐药结核分枝杆菌缺失突变菌株的MIC值均呈现不同程度降低,其中以Pho P基因缺失突变和Pho P/Pho R基因缺失突变的结核分枝杆菌临床分离株MIC值的降低程度最为显著。结论:1.成功构建了结核分枝杆菌Pho PR双组分系统Pho P基因置换型缺失突变载体、Pho R基因置换型缺失突变载体和Pho P/Pho R基因置换型缺失突变载体。2.成功构建了Pho PR双组分系统缺失突变(包括Pho P基因缺失突变、Pho R基因缺失突变和Pho P/Pho R基因缺失突变)的各组结核分枝杆菌临床分离株。3.结核分枝杆菌Pho PR双组分系统的Pho P基因、Pho R基因和Pho P/Pho R基因的缺失突变均能够使各组结核分枝杆菌临床分离株的耐药性降低,结核分枝杆菌Pho PR双组分系统对新疆地区广泛流行的耐药结核分枝杆菌的耐药性具有调控作用。