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研究目的:本研究应用实时荧光定量PCR技术,检测microRNA-145(miR-145)及c-myc基因在急性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达情况,分析miR-145及c-myc基因在急性髓系白血病患者中表达水平的相关性,并探讨其临床意义。研究方法:1.研究对象:收集70例急性髓系白血病患者骨髓标本,其中初治组46例,按FAB分型M1 6例,M2 11例,M3 11例,M4 7例,M5 6例,M6 5例。缓解组24例,按FAB分型M1 1例,M2 9例,M3 6例,M4 3例,M5 2例,M6 3例。并收集14例非血液系统肿瘤性疾病患者作为对照组。2.引物设计与合成:应用软件premier 5.0设计并参照文献设计miR-145、内参基因U6、c-myc基因及内参基因GAPDH的引物序列。3.采用淋巴细胞分离液分离骨髓单个核细胞并提取总RNA,应用实时荧光定量PCR对miR-145及c-myc基因的表达进行检测,并计算其相对表达值。4.应用SPSS 17.0统计学软件处理数据。因为数据呈非正态分布或方差不齐,所有数据均采用中位数(极小值~极大值)表示,采用Mann-whitney U秩和检验对数据分别进行差异性分析,miR-145表达水平与c-myc基因、骨髓原始细胞比例、外周血白细胞计数、血红蛋白含量及血小板计数相关性分析行Spearman相关性检验,P<0.05为差异有统计学意义。研究结果:1.miR-145在AML各组相对表达水平呈偏态分布:初治组表达为0.560(0.004~6.037)、缓解组表达为5.712(1.323~22.846)、对照组表达为14.547(2.019~41.466)。初治组miR-145表达水平明显低于缓解组及对照组,具有显著性差异(P<0.001),缓解组低于对照组,差异具有统计学意义(P=0.012<0.05)。2.初诊AML患者中miR-145表达水平与初诊时外周血白细胞数、血红蛋白、血小板计数及初诊时骨髓原始细胞百分比均无统计学相关性(r=-0.129,P=0.394;r=-0.075,P=0.620;r=-0.009,P=0.95;r=-0.125,P=0.408)。3.通过检测9例的初治白血病患者与其第一次缓解后骨髓中miR-145的表达水平发现,缓解后比初诊时miR-145的表达水平明显上调(P<0.05)。4.miR-145在亚型中表达的差异:46例AML患者中miR-145在预后较好的M3型表达为0.639(0.013~5.751),非M3型表达为0.545(0.004~41.466),差异无统计学意义(P=0.887)。5.c-myc基因的mRNA在AML患者各组表达不同,初治组表达为7.668(0.013~36.098)、缓解组表达为0.976(0.076~13.212)、对照组表达为0.190(0.005~2.702)。初治组c-myc表达水平明显高于缓解组及对照组,具有显著性差异(P<0.001),缓解组高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.015<0.05)。6.c-myc在亚型中表达的差异:46例AML患者中c-myc在预后较好的M3型表达为7.48(0.06~23.98),非M3型表达为7.75(0.01~36.10),差异无统计学意义(P=0.78)。7.统计学分析miR-145和c-myc基因mRNA表达水平之间的相关性:初治AML患者中miR-145与靶基因c-myc的表达水平之间存在负相关(r=-0.564,p<0.001)。8.结论:1、AML患者骨髓单个核细胞中miR-145的表达水平比对照组明显降低,提示miR-145可能在AML发病起抑制作用。2、c-myc基因在AML患者骨髓单个核细胞中的表达水平比对照组明显增高,c-myc基因与AML的发生密切相关。3、AML中miR-145的表达和c-myc基因mRNA表达水平呈负相关。4、miR-145及与c-myc初诊时外周血白细胞数、血红蛋白含量、血小板计数、骨髓原始细胞比例及初诊时AML免疫分型之间均无明显相关性。