目的:近年来免疫疗法成为癌症治疗的热点,但需要找到更合适的治疗靶点。研究表明,腺病毒E1A结合蛋白p300(EP300,下简称p300),作为组蛋白乙酰基转移酶家族的成员,通过乙酰化组蛋白和转录因子促进转录,调控肿瘤进程。因此我们探究p300在抗肿瘤免疫应答中发挥的作用,为p300作为免疫治疗靶点的转化应用提供理论支持。方法:选用免疫健全的C57BL/6小鼠和免疫缺陷的Nu/Nu小鼠,建立皮下移植瘤模型,通过使用p300抑制剂或者Crispr-cas9技术将p300基因敲除,观察p300对肿瘤生长的影响。构建p300过表达细胞系,观察p300过表达对肿瘤生长的作用。使用免疫荧光染色、酶联免疫斑点实验检测p300缺失后肿瘤微环境中免疫细胞组成和功能变化。构建RFP-GFP-LC3过表达的细胞系,使用免疫荧光方法在激光共聚焦显微镜下观察p300缺失对自噬流的影响,通过蛋白质免疫印迹实验验证p300缺失后AMPK/ULK1与自噬相关通路关键蛋白的表达情况。结果:(1)p300过表达能够促进C57BL/6小鼠的肿瘤生长。(2)p300抑制剂对C57BL/6小鼠皮下移植瘤有一定的疗效,而未对裸鼠皮下移植瘤的治疗发挥作用。(3)p300基因缺失能够抑制C57BL/6小鼠的肿瘤生长,而裸鼠体内对肿瘤的生长未显示抑制作用。(4)p300-/-肿瘤内显示更多的免疫细胞浸润和干扰素释放。(5)饥饿条件下观察自噬流变化,相较于对照组,p300缺失后细胞自噬发生明显增多,自噬受体SQSTM1/p62表达下调,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ增加。此外,p300缺失可以上调AMPK/ULK1通路相关蛋白,AMPK磷酸化增多,上调其下游ULK1、ATG13和FIP200等蛋白水平。结论:p300缺失通过激活AMPK/ULK1途径增强细胞自噬水平,促进自噬依赖性的ATP释放,进而激发免疫原性细胞死亡,发挥对肿瘤生长的抑制作用。诱导有效和持续的抗肿瘤免疫成为肿瘤治疗的巨大潜力,因此p300有望成为肿瘤治疗新的靶点。