基于功能核酸的传感器研究

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功能核酸是具有特殊功能的核酸序列,可以特异性识别目标或是催化反应,该类物质因其特性,在生物分析、食品安全检测、环境分析、药物检测等方面表现出了巨大的潜力。本文利用利用功能核酸的识别以及催化功能,结合纳米粒子良好的修饰功能和光学特性,建立了多种功能核酸传感器,具体内容如下:第一部分实验是利用具有催化功能的脱氧核酶来构建适体及核酸传感器。该脱氧核酶的催化依赖于G(鸟嘌呤)-四分体的形成。实验将组成G-四分体脱氧核酶的核酸序列分成两段,分别与修饰在金纳米表面的目标物核酸适体或是核酸探针杂交,从而固定在金纳米表面;加入目标物后,由于适体与其目标物之间以及互补序列DNA之间的特异性结合,从而打破之前的杂交,脱氧核酶的两个组成部分从金纳米表面释放,加入辅助因子血晶素后三者结合成脱氧核酶,催化鲁米诺化学发光。通过该方法建立了适体传感器和核酸传感器。分段式的脱氧核酶设计可以有效降低背景噪声,整个分析过程尽可在均相体系中进行,检测之前无需分离,检测灵敏。本论文的第二部分实验是利用某些金属离子对特定碱基错配能起到稳定作用的特性实现对相应金属离子的检测。由于金属离子Hg2+能与核酸中的胸腺嘧啶形成T-Hg2+-T,而Ag+能与胞嘧啶作用,分别对T-T以及C-C碱基错配形成稳定作用。实验设计了基于纳米金的离子探针,通过对离子的识别实现对聚集纳米金的解离。在识别前后,由于尺寸变化局域表面等离子共振效应,整个体系的紫外吸收发生变化,检测这一变化从而达到检测金属离子的目的。
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