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[目的]研究巴氏蘑菇多糖(Agaricus Blazei Murrill polysaccharide, ABMP) 对巨噬细胞MAPK信号转导通路的影响,探讨ABMP的免疫调节机制。[方法](1)4000、2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.62、7.8125、 3.906、1.953 μg/mL的ABMP作用巨噬细胞RAW 264.724 h,运用MTT法检测ABMP对巨噬细胞RAW 264.7增殖作用的效果。(2)不同浓度ABMP及脂多糖(LPS,阳性对照)作用巨噬细胞RAW264.76 h；更换含有ABMP和LPS的细胞培养液作用24 h。然后分别收集细胞,提取细胞内总RNA,采用实时荧光定量法(RT-PCR)测定巨噬细胞JNK、ERK、p38 mRNA表达量；提取巨噬细胞全细胞蛋白,采用蛋白免疫印迹western blot测定蛋白JNK1/2、ERK1/2、p38及其磷酸化蛋白的含量。[结果](1)采用浓度分别为4000、2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、 15.62、7.8125、3.906、1.953 μg/mL的ABMP对小鼠巨噬细胞RAW 264.7进行孵育,24 h后通过MTT对其细胞活力进行检测。结果表明,ABMP对RAW 264.7巨噬细胞的抑制率随着浓度的增加而逐渐升高,最适细胞生长浓度为1000μg/mL。同时,进行了三种抑制剂浓度的筛选,结果发现,处理组与对照组相比,当NK、ERK和p38抑制剂浓度分别大于6.25 μmol、20 μmol和6.25 μmol时对细胞的抑制作用明显增强。(2)加500 μg/mL、1000μg/mL、2000μg/mL等不同浓度的ABMP的培养基培养RAW 264.7小鼠巨噬细胞1 h,再用含有不同浓度ABMP和终浓度为1μg/mL LPS的培养基共同培养细胞,培养6 h,收集细胞并检测相关基因的mRNA相对表达量。结果表明：不同浓度的ABMP均能极显著的抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞JNK、ERK、p38 mRNA的相对表达量,在ABMP浓度为1000 μg/mL时,各个基因的抑制率最大,说明ABMP能够抑制LPS诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞中JNK、ERK、p38 mRNA的表达。(3)以β-actin作为内参进行校正,蛋白免疫印迹结果显示,ABMP浓度在500-2000 μg/mL范围内,对LPS诱导下的小鼠巨噬细胞RAW 264.7 MAPK信号通路蛋白均有一定的抑制作用,并且对磷酸化蛋白的效果较为明显。其中,当ABMP浓度为1000 μg/mL时,对蛋白JNK、p-JNK、ERK1/2、p38抑制效果最为显著。当多糖浓度为500 μg/mL时,对蛋白p-ERK、p-p38抑制效果最为显著。[结论]BMP可促进巨噬细胞RAW 264.7细胞增殖,并通过MAPK信号转导通路调节巨噬细胞RAW 264.7的免疫功能,JNK、ERK、p38均是ABMP作用的分子靶点。